Наружный генитальный эндометриоз – хроническое рецидивирующее заболевание, патогенез которого остается до конца не изученным. Эндометриоз делит общие черты с опухолевым процессом. Так, для данного заболевания характерно распространение ткани, подобной эндометрию, вне полости матки. Пролиферация и инвазия клеток в эктопических очагах возможна только при нарушении местных процессов иммунной защиты. Одним из механизмов избегания иммунологического надзора, доказанным для опухолевого процесса, является использование контрольных точек. Контрольные точки представляют собой белки, расположенные на поверхности клеток иммунной системы (преимущественно Т-лимфоцитов). Связывание контрольных точек с их лигандами на поверхности опухолевой клетки приводит к ингибированию клеток иммунитета и помогает таким образом опухоли «выжить». В данном обзоре собраны данные литературы об известных на сегодняшний день контрольных точках: CTLA-4, PD-1, LAG-3, Tim-3, TIGIT, 4-1BB, GITR. Рассмотрены наиболее изученные их лиганды такие как (CD80/CD86, PD-1L, Gal-3, Gal-9). В обзоре систематизированы данные о клетках, на которых экспрессируются контрольные точки и их белки с ними связывающиеся, приведены примеры опухолей, которые используют данное взаимодействие для защиты от распознавания. Помимо этого, в обзоре описаны препараты – ингибиторы контрольных точек, успешно используемые в терапии определенных опухолей. Наряду с отсутствием полноты знаний о патогенезе эндометриоза, на сегодняшний день единственным достоверным методом его диагностики является проведение лапароскопии с визуализацией очагов и последующим их гистологическим исследованием. В обзоре собраны результаты исследований, посвященных изучению некоторых биомаркеров для неинвазивной диагностики эндометриоза: CA-125, MCP-1, IL-6, BDNF и других. Авторами рассмотрены результаты нескольких работ, в которых иммунные контрольные точки изучались в аспекте наружного генитального эндометриоза. Следует подчеркнуть, что по результатам этих исследований экспрессия контрольных точек Т-лимфоцитами и концентрация растворимых форм была значимо повышена среди женщин с эндометриозом. Также в обзоре представлены результаты эксперимента, в котором определение уровня одного из лигандов контрольных точек в крови пациенток показало высокую чувствительность и специфичность. Таким образом, изучение контрольных точек в качестве механизма, потенциально используемого эндометриоидными клетками для уклонения от иммунологического ответа, а также биомаркеров неинвазивной диагностики является многообещающим направлением. 

Иммунные контрольные точки (ИКТ) представляют собой обширный и разнообразный комплекс стимулирующих и ингибирующих сигнальных путей, которые играют важную роль в осуществлении точной регулировки иммунных реакций. Молекулы ИКТ могут существовать как в мембранной, так и в растворимой форме. Традиционно ИКТ считались исключительно связанными с клеточной мембраной системами рецепторов и лигандов, способными запускать или блокировать функционирование иммунных клеток, однако за последнее десятилетие доказано их существование в виде растворимых форм (растворимые молекулы иммунных контрольных точек или sИКТ). Растворимые молекулы ИКТ являются биологически активными регуляторами, участвующими в паракринной и системной модуляции иммунных реакций, подобно цитокинам. В периферической крови здоровых людей присутствуют sИКТ, обладающие свойствами как стимуляторов, так и ингибиторов иммунной системы, и их баланс может нарушаться при многих онкологических заболеваниях, а том числе, злокачественных заболеваниях системы крови, COVID-19, ВИЧ-инфекции, злоупотреблении алкоголем. Накоплено большое количество данных в пользу наличия связи между sИКТ и различными заболеваниями, при этом ряд ключевых аспектов биологии растворимых контрольных точек до конца не уточнен. Наиболее широко известными и изучаемыми являются такие молекулы ИКТ, как PD-1 (programmed death receptor-1) и его лиганды  PD-L1 и PD-L2, а также CTLA-4 (cytotoxic T-lymphocyte antigen-4), TIM-3 (T cell immunoglobulin and mucin-domain containing-3), VISTA (V-domain Ig-containing suppressor of T cell activation). Механизмы образования растворимых форм достаточно сложны и разнообразны и включают альтернативный сплайсинг, отщепление мембранных эктодоменов, протеолитическое расщепление. Так среди молекулярных механизмов, лежащих в основе синтеза и высвобождения sPD-1 и sPD-L1, наиболее важными являются альтернативный сплайсинг мРНК и трансляция изоформ, лишенных трансмембранных доменов, тогда как образование растворимой формы TIM-3 происходит путем разрезания внеклеточных участков трансмембранных белков посредством протеазы (шеддазы) ADAM10. В обзорной статье приведены данные об основных sИКТ, включая sPD-1, sPD-L1, экзосомальный sPD-L1, sCTLA-4 и ряд других. Описаны молекулярные механизмы их образования, биологические функции в поддержании иммунного гомеостаза, а также прогностическое значение изменения их содержания у больных злокачественными новообразованиями (включая немелкоклеточный рак легкого, гепатоцеллюлярный рак, рак молочной железы, рак почки, рак кожи, рак желудка и ряд других), а также при злокачественных заболеваниях системы крови (включая лимфомы, хронический лимфолейкоз, острый миелобластный лейкоз, множественную миелому).

Enterococcus faecium, Staphylococcus aureus, Klebsiella pneumoniae, Acinetobacter baumannii, Pseudomonas aeruginosa и Enterobacter spp. – являются представителями группы ESKAPE, характеризующейся наибольшей устойчивостью к антибиотикам.  В связи с широким распространением патогенов и их опасностью для системы здравоохранения актуальным остается поиск новых путей терапии бактериальных инфекций.

Антибиотики впервые были получены в начале двадцатого века, однако их повсеместно распространение началось в годы Второй Мировой Войны. На сегодняшний день спектр антибактериальных препаратов широк, но несмотря на это проблема устойчивости бактерий к ним стоит остро.

Актуальной задачей современной науки считается поиск преодоления резистентности бактерий к антибактериальным препаратам. Поскольку поиск новых классов веществ является долгим и дорогостоящим процессом, Применяют комбинированные схемы приема препаратов, модифицируют способы доставки антибиотиков к очагу инфекции в организме, изменяют строение молекул действующего вещества, используют адъюванты.

NK-клетки традиционно рассматриваются как часть противоопухолевого или противовирусного иммунитета. Однако в связи с появлением данных, свидетельствующих о наличии в них антибактериальных белков и способности проявлять цитотоксичность против клеток, зараженных внутриклеточными прокариотическими организмами, на сегодняшний день их можно рассматривать, как компонент антибактериального иммунитета.

Клетки линии NK-92 воспроизводят характеристики NK-клеток, обладают сходными свойствами. Кроме того, активно изучается возможность их применения в качестве компонента противоопухолевой терапии, проводятся клинические испытания, находящиеся на разных этапах. В совокупности с антибактериальными свойствами NK-клеток и вышеописанными фактами становится возможным применения клеток линии NK-92 как адъюванта при антимикробной терапии инфекций, вызванных устойчивыми к антибиотикам бактерий.

В обзоре представлены данные о возможности использования клеточной линии NK-92 и продуцируемых ими микровезикул (МВ) для борьбы с устойчивыми к антибиотикам бактерий группы ESKAPE. В настоящее время исследований в этой области недостаточно, однако изложенные в обзоре данные об NK-клетках позволяют предложить клеточную линию, воспроизводящую их характеристики и продуцируемые ими МВ, в качестве перспективного адъюванта антибактериальной терапии.

Представлены последние достижения в понимании механизмов, лежащих в основе предрасположенности к иммуноопосредованному увеиту (ИУ) и его патогенеза. Подробно описаны модели увеита человека на животных, среди которых наиболее охарактеризованными моделями экспериментального переднего увеита являются эндотоксин-индуцированный увеит и экспериментальный аутоиммунный передний увеит. В результате этих исследований были идентифицированы такие факторы транскрипции как STAT3, Interferon regulatory factor 4,8, регуляторные белки - Suppressor of cytokine signaling 1, 3 (SOCS1 , SOCS3 ) и пути передачи сигналов цитокинов, которые регулируют развитие ИУ и могут служить потенциальными терапевтическими мишенями для лечения. Охарактеризованы факторы риска окружающей среды способствующие развитию ИУ. Представлены данные о влиянии физической активности, курения, состояния микробиома кишечника, диеты на частоту возникновения ИУ, описаны известные и предполагаемые механизмы участия факторов риска в инициации и патогенезе болезни. В частности, изложены результаты исследований свидетельствующих о существовании двух основных механизмов участия микробиома кишечника в развитии ИУ: антигены микробиома кишечника действуют как триггеры активации Т-клеток, специфичных для антигенов сетчатки и микробиом модулирует баланс эффекторных субпопуляций Т – лимфоцитов (Th1 и Th17) и субпопуляций иммунорегуляторных клеток (Treg). Изложены сведения о том, что высокий уровень экспрессии глазных белков (межфоторецепторный ретиноид-связывающий белок - IRBP или S-антиген) в тимусе коррелировал с устойчивостью к развитию EAU, тогда как низкий уровень коррелировал с предрасположенностью к увеиту. Эти основополагающие исследования патогенеза ИУ позволило дать объяснение избирательной восприимчивости к аутоиммунному увеиту и предположить, что резистентность к увеиту регулируется, по крайней мере частично, способностью сохранять центральную толерантность к аутоантигенам сетчатки. Описано, что увеитогенные Т-клетки памяти перемещаются из сетчатки и периферических лимфоидных тканей в костный мозг, находясь там в состоянии покоя до повторной стимуляции, превращаясь в различные субпопуляции эффекторных клеток. Анализ результатов иммунологических исследований на модели увеита у мыши и перферической крови пациентов с увеитом человека выявил патогенетическую роль Th17 лимфоцитов и активатора транскрипции STAT3 в развитии аутоиммунного увеита и сигнальный белок STAT3 является потенциальной терапевтической мишенью при неинфекционном увеите.

Ангиогенез – образование сосудов из уже существующих, рассматривается как один из этапов формирования сосудов. Описано два типа ангиогенеза: разветвляющий и неразветвляющий. Ангиогенез задействован как в физиологических, так и патологических процессах, что обусловливает интерес к его изучению со стороны биомедицины. Протекание ангиогенеза состоит из 6 этапов, находящихся под контролем факторов микроокружения, в том числе, цитокинов и ростовых факторов, каждый из которых может обладать активирующим (проангиогенным) или ингибирующим (антиангиогенным) эффектом. Лиганд-рецепторые взаимодействия клеток, окружающих место образования сосудов, также могут оказывать влияние на этот сложный процесс. На сегодняшний день молекулярные механизмы воздействия цитокинов и ростовых факторов, а также межклеточных взаимодействий на ангиогенез остаются не изученными в полной мере. Однако показано, что сигналы, получаемые при ангиогенезе его участниками – клетками эндотелия, вызывают запуск в них каскадов реакций, приводящих к изменению экспрессии генов, влияя на фенотип и функцию клеток, на характер протекание процесса образования сосудов. Целью обзора служила систематизация современных представлений об ангиогенезе, молекулярных механизмах, задействованных в этом процессе. В обзоре представлены данные о характеристиках популяций эндотелиальных клеток в растущем сосуде, этапах ангиогенеза и факторах, контролирующих формирование сосудов. В обзоре освещены последние данные о сигнальных путях PI3K/Аkt, MАPK/ЕRK, mTОR, RhоА, Rас, Notch, Smаd2/3, Smаd1/5/8, STАT3, STАT5, NF-κB и молекулах, индуцируемых в эндотелиальных клетках при их взаимодействии с цитокинами, ростовыми факторами, а также при активации некоторых поверхностных рецепторов эндотелия (VЕGFR1, VЕGFR2, VЕGFR3, Tiе1, Tiе2, FGFR, PDGFR-α, PDGFR-β, TNFR1, TNFR2, VЕ-кадгерин, TβRI, TβRII). Особое внимание уделено описанию взаимодействия TGFβ сигналинга с другими сигнальными путями при ангиогенезе. Также в обзоре представлены современные данные об ингибиторах сигнальных путей, которые могут быть использованы как при изучении ангиогенеза, так и при необходимости его коррекции в терапии. В обзоре суммированы данные о 29 ингибиторах, находящихся на разных стадиях внедрения – от исследований in vitro, до применения в клинической практике.

Аннотация

Липополисахарид (ЛПС, эндотоксин) грамнегативной флоры является одним из сильнейших активаторов нативной иммунной системы и индуктором системного и локального воспаления. В связи с увеличением количества факторов, способствующих транслокации ЛПС в системный кровоток, будь то неадекватная антибиотикотерапия, применение энтеро- и гепатотоксичных лекарственных препаратов, а также повышение доли углеводной и жирной пищи в рационе современного человека, роль ЛПС в поддержании воспалительного фона, в том числе низкоинтенсивного растёт. Взаимодействия эндотоксина с организмом человека опосредованы целым рядом рецепторов и молекул переносчиков, многие из которых можно выделить в группу так называемых “липополисахаридсвязывающих систем”, а именно липополисахарид-связывающий белок (LBP) и бактерицидный белок повышенной проницаемости бактерий (BPI). Характер ответа на повышение циркулирующего в крови пула ЛПС во многом зависит от данных молекул, а также дополнительных молекул, взаимодействующих с ЛПС и ЛПС-связывающими системами, в частности - липопротеидов низкой (LDL) и высокой плотности (HDL). Учитывая имеющиеся в литературе данные о регистрации повышенных уровней ЛПС у пациентов с ревматоидным артритом (РА), а также наличия у данных пациентов в подавляющем большинстве дислипидемических состояний, ЛПС потенциально является патогенетически важным фактором при РА. В данном обзоре представлены основные данные о биологии и роли ЛПС и “липополисахаридсвязывающих систем” в развитии и поддержании воспаления при РА.  Поиск информации проводился по ключевым словам “ревматоидный артрит и липополисахарид”, “ревматоидный артрит и липополисахарид-связывающий белок”, “ревматоидный артрит и BPI” в зарубежных и отечественных наукометрических базах, в том числе e-Library и PubMed. Представленные данные дают право считать сочетание дисбаланса “липополисахаридсвязывающих систем” и дислипидемии важным отягощающим провоспалительным фактором при РА, а поиск механизмов влияния на эти состояния по отдельности и в комбинации перспективным научным и клиническим направлением.

Обзор посвящен двум ключевым цитокинам Th2 - IL-4 и IL-13, которые напрямую участвуют в иммунопатогенезе атопического дерматита. Впервые об идентификации IL-4 и IL-13 при АД сообщили Hamid Q. et al. в 1994 году. За это время появилось огромное количество исследований, подтверждающих связь этих цитокинов Th2 с нарушением эпидермального барьера кожи; снижением иммунного ответа кожи за счет ингибирования экспрессии антимикробных пептидов против золотистого стафилококка и т. д. Исследования также убедительно подтверждают связь с IL-4/IL-13 таких клинических проявлений атопического дерматита, как кожные инфекции, а также воспаление, лихенизация и зуд кожи. Роль IL-4 и IL-13 подтверждается и клиническими исследованиями, которые указывают на благоприятное влияние препаратов, ингибирующих эти цитокины, на купирование кожных симптомов атопического дерматита (зуд, высыпания). Оказалось, что IL-4 и IL-13 связывают сигнальный путь JAK/STAT за счет общей α-субъединицы рецептора IL-4 - IL–4Ra. Еще одной важной способностью IL-4, IL-13 и других цитокинов (включая IL-31), является активация сенсорных нейронов, поэтому их часто рассматривают как мощные пруритогены. В статье обсуждаются также вопросы, касающиеся роли сигнального пути JAK/STAT и, в частности, белка JAK1 в развитии атопического дерматита. Исходя из патогенетической значимости IL-4 и IL-13, в последнее время были разработаны препараты, блокирующие их активность и тем самым воздействующие на важные молекулярные пути развития атопического забоелвания. Эти препараты классифицируются как системная терапия, которая включает, в том числе: 1). биологическую терапию (дупилумаб, первое моноклональное антитело IgG4), который блокирует IL–4Ra и тем самым подавляет ось IL-4/IL-13, и 2). ингибиторы янускиназы (JAK) или ингибиторы малых молекул (на сегодня в России доступны такие препараты из группы ингибиторов янускиназы, как аброцитиниб, упадацитиниб и бароцитиниб). Исследования показывают, что и биологичекая терапия, и малые молекулы оказывают иммуномодулирующее действие на течение атопического дерматита. В обзоре кратко представлены основные данные недавних метаанализов по сравнительной характеристике биологической терапии и ингибиторов янускиназы при данном заболевании.

Хронический риносинусит (ХРС) — патология, которая проявляется воспалением в верхних дыхательных путях и в которой можно выделить два главных фенотипа: РС с полипозной тканью в носу и околоносовых пазухах и РС без полипов. Полагаясь на высокие концентрация различных цитокинов, воспалительные реакции при ХРС можно разделить на три эндотипа: Тh1 (IFN-γ), Th2 (IL-4, IL-5 и IL-13) и Тh3 (IL-17, IL-22). Патогенез воспаления при ХРС без назальных полипов, так и при ХРС с назальными полипами достаточно различен, а частота встречаемости вышеуказанных эндотипов весьма противоречива по данным исследований, что подтверждает целесообразность дальнейшего изучения этапов развития ХРС. Эти важные медико-социальные черты заболеваний слизистой носа и придаточных пазух обуславливают необходимость дальнейшего исследование патогенеза ХРС. В данном обзоре освещена информация об иммунологических особенностях и дисфункциях, приводящих к появлению хронического риносинусита с полипами или без них. Цель данного обзора – изучить, по данным литературы, влияние первой линии защиты, компонентов врожденного и приобретенного иммунитета на патогенез полипозного и неполипозного ХРС.

В статье представлен обзор зарубежной научной литературы. Авторами был проведён научный поиск по тематике иммунного ответа при формировании хронических риносинуситов с полипами и без них. Использовали соответствующие ключевые слова и фильтры, в поисковых системах PubMed и Google Scholar, по базам данных Scopus, Web of Science.

Низкая эффективность различных используемых методов лечения может быть обусловлена гетерогенной иммунопатологией. Использование биологических препаратов, хотя и одобрено, может быть ненадежным, поскольку эти препараты, воздействующие на Тh2, могут вводиться пациентам с заболеванием, не связанным с Тh2. Наличие эозинофилов и гноя могут дать основу для экстраполяции эндотипа, но сейчас у врачей, лечащих ХРС нет широкого распространенного доступа к лабораторным анализам для типирования РС и обоснования медикаментозной тактики. Пациенты с любым типом воспаления могут страдать от скрытых инфекций, вызванных бактериями и грибами или вирусами, и это затрудняет диагностику поляризации иммунного ответа. Дальнейшее изучение звеньев иммунологического патогенеза ХРС позволит разработать персонифицированный алгоритм диагностики и лечения таких больных.

Тромбоциты – это небольшие постклеточные элементы мегакариоцитов, циркулирующие в крови. На их поверхности представлены молекулы межклеточной адгезии, Toll-подобные рецепторы, рецепторы хемокинов и цитокинов и другие. Тромбоциты содержат соединения с разнообразной биологической функцией, в том числе хемокины, цитокины и ростовые факторы. Благодаря особенностям цитологического строения – мембранной системе и секреторным гранулам – тромбоциты способны быстро активироваться и вступать во взаимодействие с другими клетками. Тромбоциты участвуют в гемостазе, иммунных реакциях, ангиогенезе. Активация, необходимая тромбоцитам для выполнения своих функций, опосредуется через ионы кальция и может инициироваться компонентами субэндотелия, белками системы комплемента, продуктами секреции других тромбоцитов. При активации тромбоциты высвобождают секреторные гранулы, изменяют морфологию. Помимо этого, тромбоциты, подобно другим клеткам организма, в норме и при патологии продуцируют микровезикулы – сравнительно новый объект, интенсивное изучение которого ведется в настоящее время.

Целью настоящего обзора явилось сравнительное описание тромбоцитов и их микровезикул, которым тромбоциты делегируют некоторые свои функции как посредникам коммуникации с другими клетками, в том числе эндотелиоцитами. Микровезикулы являются перспективным объектом исследования, изучается возможность их использования в качестве диагностического и терапевтического агента. Наибольшая часть микровезикул, циркулирующих в периферической крови, имеют тромбоцитарное происхождение. В составе микровезикул тромбоцитов присутствуют цитокины и другие белки, липиды и нуклеиновые кислоты (ДНК, мРНК, микроРНК). На поверхности микровезикул тромбоцитов сохраняются поверхностные маркеры родительских клеток; на их мембране представлен фосфатидилсерин, который дополнительно участвует в тромбообразовании за счет аккумулирования факторов коагуляции. Под влиянием сигналов микроокружения состав, фенотип тромбоцитарных микровезикул, а также их функциональная направленность в отношении эндотелия может варьировать в зависимости от стимула. Эффект, оказываемый ими на ангиогенез и регенерацию недостаточно изучен, экспериментальные данные демонстрируют как положительное, так и отрицательное влияние. При различных патологиях, сопровождающихся эндотелиальной дисфункцией (сердечно-сосудистые патологии, преэклампсия, диабет), наблюдается повышение уровня тромбоцитарных микровезикул, что указывает на их возможное участие в патогенезе заболеваний. Тем не менее, влияние тромбоцитов и их микровезикул на эндотелий, в том числе активации в эндотелии различных сигнальных путей, остается предметом дальнейших исследований.

Главный комплекс гистосовместимости (HLA-система) является одной из наиболее полиморфных генетических систем человека. Распределение HLA-аллелей и гаплотипов отличается в пределах определенных этносов и географических регионов. В связи с влиянием внутренних и внешних факторов (значительная территория России, многонациональный состав населения, межэтнические контакты), русские популяции, сформировавшиеся в различных регионах нашей страны, могут иметь различия иммуногенетических характеристик. Целью настоящего исследования являлось определение генетических дистанций между русскими различных регионов России и другими российскими и мировыми популяциями. Согласно полученным данным, у русских, являющихся жителями Санкт-Петербурга, Нижнего Новгорода и Ростова-на-Дону, наблюдалось схожее распределение групп аллелей HLA-генов. Независимо от региона проживания, максимально распространенными у обследованных русских являлись общеевропейские HLA-гаплотипы A*01-B*08-C*07-DRB1*03-DQB1*02 и A*03-B*07-C*07-DRB1*15-DQB1*06. Девять из десяти наиболее часто встречающихся HLA-гаплотипов у жителей Санкт-Петербурга и Нижнего Новгорода совпадали. Помимо упомянутых выше, к их числу относились: A*02-B*13-C*06-DRB1*07-DQB1*02, A*03-B*35-C*04-DRB1*01-DQB1*05, A*02-B*07-C*07-DRB1*15-DQB1*06, A*02-B*18-C*07-DRB1*11-DQB1*03, A*25-B*18-C*12-DRB1*15-DQB1*06, A*02-B*41-C*17-DRB1*13-DQB1*03, A*30-B*13-C*06-DRB1*07-DQB1*02. Гаплотип A*02-B*15-C*03-DRB1*04-DQB1*03, принадлежавший к числу десяти наиболее распространенных у русских-жителей Санкт-Петербурга, значительно реже определялся у русских-нижегородцев (частота 0,0119 против 0,0034, p=0,03) и не был установлен у русских-ростовчан. Профиль HLA-гаплотипов, характерных для русских, проживающих в Ростове-на-Дону, имел более выраженные отличия. В частности, у русских-ростовчан к числу 16-ти HLA-гаплотипов, встречающихся с частотой более 0,01, принадлежали: A*23-B*44-C*04-DRB1*07-DQB1*02, A*02-B*57-C*06-DRB1*07-DQB1*03, A*24-B*35-C*04-DRB1*11-DQB1*03, A*01-B*52-C*12-DRB1*15-DQB1*06, A*11-B*35-C*04-DRB1*01-DQB1*05, A*02-B*27-C*02-DRB1*01-DQB1*05, A*02-B*44-C*02-DRB1*16-DQB1*05.  Два из перечисленных гаплотипов (A*24-B*35-C*04-DRB1*11-DQB1*03 и A*02-B*44-C*02-DRB1*16-DQB1*05) не были установлены у русских Нижнего Новгорода, частота остальных пяти гаплотипов у нижегородцев не достигала 0,01. У русских Санкт-Петербурга перечисленные выше гаплотипы ростовчан определялись с частотой менее 0,01. Статистически достоверные различия были выявлены только для гаплотипа A*23-B*44-C*04-DRB1*07-DQB1*02 (частота 0,0246 против 0,0062, р=0,01). Расчет генетических дистанций между популяциями показал, что наиболее близкими к русским, проживающим в Санкт-Петербурге, являются русские-жители Нижнего Новгорода, а также русские Москвы и белорусы.  Генетическая дистанция между русскими-петербуржцами и русскими, проживающими в Ростове-на-Дону и Челябинской области, несколько больше. Сравнение генетических расстояний между представителями различных славянских популяций показало, что наиболее близки друг другу восточные (белорусы, русские) и западные (поляки, словаки, чехи) славяне. Популяции южных славян (сербы, хорваты, македонцы) являются более удаленными. Результаты выполненного исследования могут быть использованы для изучения процессов этногенеза, проведения научных исследований взаимосвязи HLA-генетических факторов с заболеваниями, а также применяться в практической деятельности регистров доноров гемопоэтических стволовых клеток.

Цель работы. Обосновать эффективность терапии антифосфолипидного синдрома (АФС) у беременных с использованием плазмафереза и имммуноглобулинов для внутривенного введения.

 Материалы и методы. Обследованы 92 женщины с диагностированным АФС и 47 женщин без АФС с физиологически протекающей беременностью. Пациентки были разделены на группы в зависимости от применяемого способа лечения: только стандартная терапия, плазмаферез в дополнение к стандартной терапии, иммуноглобулины для внутривенного введения (ВВИГ) в дополнение к стандартной терапии, и комплексное лечение – плазмаферез и ВВИГ в дополнение к стандартной терапии. В сыворотках и плазме периферической крови определяли содержание суммарных антифосфолипидных антител и параметров гемостаза, а также Р-селектина, до и после лечения.

Результаты. Установлено, что достоверно более высокая частота благоприятных исходов беременности – 96,3% (срочные роды) - была в группе пациенток с АФС, получавшим сочетанную терапию. Установлено, что наиболее значимое снижение уровня антифосфолипидных антител наблюдалось в группе с сочетанным применением плазмафереза и ВВИГ на фоне традиционной терапии. У женщин с физиологически протекающей беременностью без антифосфолипидных антител экспрессия Р-селектина была достоверно ниже по сравнению с беременными с АФС.

Выводы. Применение комплексного подхода с использованием плазмафереза, иммуноглобулинов для внутривенного введения на фоне стандартной терапии является наиболее эффективным методом лечения невынашивания беременности, связанного с АФС. Использование данного метода позволило сократить частоту акушерских осложнений и улучшить исходы беременности за счет увеличения частоты срочных родов. Определение уровня Р-селектина до и после лечения позволяет оценить уровень активации тромбоцитов, эффективность проводимых методов терапии и корректировать неблагоприятные показатели тромбоцитарного звена гемостаза в ходе терапии.

Бенз(а)пирен – ароматическое соединение первого класса опасности, обладающее канцерогеннным, мутагенным, гематотоксическим, в том числе иммунотропным, эффектами. Изучение клеточных кластеров в условиях воздействия экзогенных гаптенов in vivo с использованием в качестве модельного объекта белых нелинейных мышей позволяет расширить наши знания о механизмах и особенностях иммунотропных эффектов бенз(а)пирена, что определяет актуальность данного исследования. В эксперименте участвовали 12 самок беспородных (нелинейных) белых мышей. Концентрация бенз(а)пирена при однократном поступлении составила 6 мкг/л, в качестве нейтрализатора его эффектов и адаптогена использован концентрат Chlorella Growth Factor (CGF), последовательно поступавший в течении 4-х недель в количестве 60–70 млн/мл живых клеток, оба вещества вводились через пероральный зонд в объеме 1 мл. Исследование фагоцитарной активности клеток проводили по методике Каплина В.Н. Анализ общего количества лейкоцитов и лимфоцитов проводили с использованием унифицируемых общеклинических методов анализа на гематологическом анализаторе. Изучение кластеров клеточной дифференцировки проводилось методом проточной цитометрии (CD25, CD95, CD11а, CD309). Для статистической обработки результатов исследования применяли методы математической статистики с помощью программы Microsoft® Office Excel, Statistica 6.0. Установлено, что субхроническая (подострая) интоксикация бенз(а)пиреном в условиях эксперимента in vivo приводила к значимой модификации клеточного иммунитета по сравнению с контролем, фенотипом которой выступали дефицит факторов врожденного клеточного иммунитета (система гранулоцитарного фагоцитоза) и дисбаланс адаптивного клеточного иммунитета с преимущественным угнетением апоптотической активности (CD95+) и моделированием интегрин- и VEGF-опосредованных сценариев (CD11a, CD309). Причем последовательное поступление природного модификатора Chlorella Growth Factor характеризовалось нормализацией фагоцитарной активности и отменой индуцированных бенз(а)пиреном эффектов. Ограничения исследования, полученных результатов и выводов, обусловлены малым (ограниченным) объемом выборки. В результате изучения in vivo особенностей фагоцитоза и кластеров клеточной дифференцировки иммуноцитов мышей, в условиях последовательной экспериментальной субхронической экспозиции техногенных и природных модификаторов, выявлен дисбаланс показателей неспецифического и адаптивного клеточного иммунитета, сопряженный с формируемыми бенз(а)пиреном гранулоцитарной альтерацией и нарушением контроллинга клеточной пролиферации, отменяемые CGF. Последовательное поступление комплекса CGF приводило к оптимизации работы иммунной системы по ряду его показателей, позитивной модификации иммунотропных эффектов бенз(а)пирена, снимая супрессию гранулоцитарного и сопряженного с интегрином лимфоцитарного ростков крови, оказывая преимущественно фагоцитоз-протективные эффекты, а также  антиапоптотическое и интегрин-миметическое действие.

Псориаз является наиболее распространенным воспалительным заболеванием кожи, которым страдает в среднем 2-4% населения Земли. Согласно современным представлениям, псориаз является мультифакториальным заболеванием, возникающим у генетически предрасположенных лиц под воздействием различных факторов окружающей среды, которые запускают нарушение иммунного ответа с серией сложных воспалительных каскадов. Заболевание инициируется и поддерживается взаимным взаимодействием клеток врожденного и адаптивного иммунитета, прежде всего дендритных клеток, Т-лимфоцитов и кератиноцитов, ведущая роль которых на разных стадиях заболевания чередуется и заключается в основном в IL-23/Th17-пути. На сегодняшний день описано множество полиморфизмов генов (SNP), связанных с развитием псориаза. Для понимания патофизиологии псориаза, как сложного аутовоспалительного заболевания представляется интересным изучение межгенных взаимодействий полиморфных вариантов генов цитокинов и С- реактивного белка в отношении риска развития псориаза. Цель работы - изучить межгенные взаимодействия полиморфных вариантов генов IL1b (rs16944), IL6 (rs1554606), IL8 (rs2227306), IL10 (rs1800896), TNFα (rs361525), СRP (rs1205) связанных с риском развития псориаза у жителей Кемеровской области. Обследовано 175 пациентов с обыкновенным папулезно-бляшечным псориазом, с прогрессирующим течением, в средней степени тяжести. Контрольная группа (n=155) сформирована из условно-здоровых доноров того же возрастного интервала. Генотипирование осуществляли с помощью метода ПЦР с использованием TaqMan зондов (Thermo Fisher Scientific, США) на детектирующем амплификаторе ViiA^TM 7 Real-Time PCR System (Life Technologies, США) следующих полиморфных вариантов генов: IL1b (rs16944), IL6 (rs1554606), IL8 (rs2227306), IL10 (rs1800896), TNFα (rs361525), СRP (rs1205). Анализ межгенных взаимодействий осуществляли при помощи метода сокращения многофакторной размерности (Multifactor Dimensionality Reduction, MDR). Установлено, что детерминирование обыкновенного папулезно-бляшечного псориаза связано как с отдельными полиморфными вариантами генов цитокинов и С-реактивного белка, так и ген-генными взаимодействиями. Для отдельных полиморфных вариантов генов сила (% энтропии) ассоциации с обыкновенным папулезно-бляшечным псориазом была следующая: TNFa_rs361525 (16,99% энтропии), IL1b_rs16944 (6,40% энтропии), CRP_rs1205 (2,55% энтропии), IL6_rs1554606 (1,11% энтропии), IL10_rs1800896 (0,57% энтропии), IL8_rs2227306 (0,30% энтропии). Выявлено, что выраженным синергизмом обладали IL6 (rs1554606) и IL8 (rs2227306); умеренным синергизмом CRP (rs1205) и IL10 (rs1800896) и выраженным антагонизмом IL1b (rs16944) и TNFa (rs361525).

В настоящей работе было определено содержание антител к липопротеинам низкой плотности, модифицированным малоновым диальдегидом, концентрация холестерина циркулирующих иммунных комплексов и количество перекисно-модифицированных липопротеинов низкой плотности в крови здоровых лиц и пациентов с различными проявлениями атеросклероза. Кроме того, изучалось влияние антител к липопротеинам низкой плотности, модифицированным малоновым диальдегидом на взаимодействие таких липопротеинов с макрофагами. Всего обследовано 253 человека: здоровые лица (59 человек), пациенты с доклиническим атеросклерозом (25 человек) и пациенты с ишемической болезнью сердца (169 человек). Установлено, что у пациентов с ишемической болезнью сердца по сравнению со здоровыми лицами и пациентами с доклиническим атеросклерозом повышена концентрация холестерина циркулирующих иммунных комплексов в крови, тогда как содержание окисленных липопротеинов низкой плотности не различалось между группами обследованных. При этом у пациентов с атеросклерозом выявлена положительная корреляция между уровнями в крови окисленных липопротеинов низкой плотности и холестерина циркулирующих иммунных комплексов. Содержание в крови антител класса IgG к липопротеинам низкой плотности, модифицированным малоновым диальдегидом, достоверно снижено у больных с ишемической болезнью сердца по сравнению со здоровыми лицами и пациентами с доклиническим атеросклерозом, тогда как концентрация таких антител класса IgM практически не изменялось у пациентов с атеросклерозом независимо от его тяжести. Было показано, что специфичные антитела к липопротеинам низкой плотности, модифицированным малоновым диальдегидом, значительно снижали цитотоксичность таких ЛПНП, а также их способность вызывать накопление эфиров холестерина в макрофагах, полученных из мононуклеаров периферической крови человека. Таким образом, полученные данные свидетельствуют о том, что антилипопротеиновые антитела могут оказывать защитное действие, предупреждая гибель клеток и снижая накопление эфиров холестерина в макрофагах при их взаимодействии с модифицированными липопротеинами низкой плотности, т.е. предупреждать формирование пенистых клеток.

Несмотря на множество разнообразных методов выделения нейтрофилов из периферической крови, сохраняется актуальной проблема получения достаточного количества жизнеспособной клеточной популяции высокой степени чистоты для количественного определения нейтрофильных цитокинов и экспрессии их мРНК. Рекомендуемые многоэтапные способы очистки нейтрофилов значительно увеличивают по времени продолжительность процесса выделения, могут приводить к активации или апоптозу клеток и сопровождаются их значительными потерями. Наиболее критичным по продолжительности и количеству дополнительных разнообразных манипуляций с клетками является этап предварительной очистки нейтрофилов. В связи с этим актуальным вопросом является сравнение различных методов предварительной изоляции нейтрофилов и выбор наиболее оптимального из них для получения достаточного количества жизнеспособных периферических нейтрофилов, что и явилось целью данной работы. Нами были изучены особенности влияния трех различных протоколов предварительного выделения клеточной взвеси (центрифугирование цельной крови на одинарном градиенте плотности с последующим осаждением эритроцитов декстраном; центрифугирование цельной крови на двойном градиенте плотности; быстрое выделение лейкоцитов с использованием реагента, способствующего агрегации эритроцитов) на количество и жизнеспособность нейтрофилов, очищенных на заключительном этапе с использованием негативной иммуномагнитной селекции. Установлено, что процедура предварительного выделения нейтрофилов для последующей иммуномагнитной изоляции влияет на их количество и жизнеспособность: максимальное количество жизнеспособных нейтрофилов получается при их выделении традиционным методом центрифугирования крови на градиенте плотности с последующим осаждением эритроцитов декстраном. В то же время исследуемые нами три разных метода предварительного выделения нейтрофилов не показали статистически значимых различий по количественному выходу жизнеспособных клеток после иммуномагнитной изоляции, что предполагает использование любого из этих методов в зависимости от возможностей и предпочтений исследователей. В целом, наша работа подтверждает данные литературы о том, что многоступенчатый процесс изоляции нейтрофилов позволяет получить клеточную взвесь высокой степени чистоты (> 99.1%), которую можно использовать в дальнейшем для исследования их цитокин-секретирующей активности. Однако такая многоступенчатая изоляция значительно снижает количество нейтрофилов, что может быть критичным при исходно малых объемах крови.

Резюме.

    Введение. Были проведены исследования образцов крови у пациентов до 1 года с катарактой, глаукомой и ретинопатией недоношенных и у доношенных, соматически здоровых детей до 1 года, с целью количественного определения Т-регуляторных клеток CD4⁺CD25^highFoxp3⁺CD127^low. Объединены и структурированы  данные собственных исследований, представленные в ранее опубликованных статьях по отдельным патологиям, для полноценного сравнения их в комплексе наиболее распространенных глазных заболеваний у детей до 1 года, какими являются катаракта, глаукома и ретинопатия недоношенных.

   Целью исследования явилось сравнительное исследование количества Т-регуляторных клеток (CD4⁺CD25^highFoxp3⁺CD127^low) в крови детей до 1 года жизни с РН, катарактой, глаукомой и здоровых доношенных детей (по данным собственных исследований в ранее опубликованных работах по отдельным патологиям).

Материалы и методы. Всего было обследован 131 ребенок (262 глаза) в возрасте до 1 года. Из них 79 детей (158 глаз) с ретинопатией недоношенных, 12 детей (20 глаз) с катарактой, 13 детей (21 глаз) - с глаукомой, 9 парных глаз детей с катарактой и глаукомой и 27 здоровых доношенных детей (54 глаза) того же возраста. Детям были проведено стандартное офтальмологическое обследование. Особое внимание нами было уделено исследованию количества Т-регуляторных клеток CD4⁺CD25^highFoxp3⁺CD127^low. Произведено иммунофенотипирование клеток периферической крови, включая Т-регуляторные клетки.

Результаты. По данным ранее произведенных нами исследований и при сопоставлении результатов в представленном исследовании у детей до 1 года, были обнаружены достоверные различия по количеству Т-регуляторных клеток (CD4⁺CD25^highFoxp3⁺CD127^low) между недоношенными и доношенными детьми, а также внутри групп пациентов по весовой категории при катаракте и глаукоме. Авторам удалось определить различия между стадиями ретинопатии недоношенных по количеству Т-регуляторных клеток (CD4⁺CD25^highFoxp3⁺CD127^low), выделяя заднюю агрессивную ретинопатию недоношенных в особую форму данной патологии.

Заключение. Данное исследование является подтверждением возможного участия аутоиммунного ответа в патогенезе прогрессирующих стадий ретинопатии недоношенных. Об этом свидетельствует выявленное достоверное уменьшение количества Т-регуляторных клеток CD4⁺CD25^highFoxp3⁺CD127^low. Прогрессирующие стадии ретинопатии недоношенных сопровождаются более низкими значениями Т-регуляторов, чем стационарные. Выявлены достоверные различия по количеству Т-регуляторных клеток при основных офтальмологических заболеваниях детей в возрасте до 1 года – катаракте, глаукоме и ретинопатии недоношенных.

Background: the potential involvement of the immune system in the pathophysiology of congenital glaucoma, cataract, and retinopathy of prematurity (ROP) in infants has been suggested, yet understanding remains limited. CD4+CD25highFoxp3+CD127low, with their role in autoimmunity, are considered pivotal, although there is a scarcity of publications in this context. This study aims to address this gap.

Purpose: To compare blood serum CD4+CD25highFoxp3+CD127low levels in infants with ROP, congenital glaucoma and cataract, and healthy full-term infants.

Material and methods: This retrospective case-control study included 131 infants (262 eyes). Inclusion criteria comprised age under 12 months and a confirmed diagnosis of congenital cataract (20 eyes), congenital glaucoma (21 eyes), and ROP (158 eyes). The control group consisted of 27 full-term infants (54 eyes) with normal eye exam. Primary outcomes included blood serum CD4+CD25highFoxp3+CD127low levels in all groups. Secondary outcomes involved the correlation between CD4+CD25highFoxp3+CD127low levels and birth weight.

Results: According to our previous studies and when comparing the results in the presented study in children under 1 year of age, we found significant differences in the number of T-regulatory cells (CD4+CD25highFoxp3+CD127low) between premature and preterm children, as well as within patient groups by weight category for cataract and glaucoma. The authors were able to identify differences between stages of retinopathy of prematurity by the number of T-regulatory cells (CD4+CD25highFoxp3+CD127low), distinguishing posterior aggressive retinopathy of prematurity as a special form of this pathology.

Conclusion: The lower CD4+CD25highFoxp3+CD127low levels in infants with ROP type 1 suggests autoimmune reactions in its pathophysiology. The noteworthy difference in CD4+CD25highFoxp3+CD127low in patients with congenital glaucoma and cataract may indicate immune-mediated mechanisms in their development. The clinical significance of the established correlation between the level of studied T-cells and birth weight in infants with cataract and glaucoma is unclear and requires further investigation with regard to the disease severity. Potentially it can be used as a prognostic marker of the disease course and visual outcomes. Collectively, this study provided valuable insights on the potential targets for novel treatment strategies in infants with ROP, glaucoma, and cataracts.

Поступление алкоголя в организм во время беременности может отразиться на нормальном ходе эмбрионального развития плода, что приведет к формированию симптомов фетального алкогольного спектра нарушений (ФАСН). Имеются сведения о том, что при ряде пренатальных патологических состояниях наблюдаются изменения в регуляции механизмов экспрессии ряда про- и противовоспалительных цитокинов. В нашей исследовании мы сосредоточили внимание на изучении уровня экспрессии ряда генов про- и противовоспалительных цитокинов в переднем и височном отделах мозга крысят в постнатальном периоде развития при моделировании пренатального воздействия алкоголя (ПВА). Также оценили уровень экспрессии генов, которые ассоциированы с регуляцией экспрессией генов про- и противовоспалительных цитокинов. Кроме того, в задачи нашего исследования входило произвести фармакологическую коррекцию наблюдаемых изменений потенциальным фармакологическим агентом – рифампицином, который по данным других исследований оказывал нейропротекторный эффект.

Резюме. Беременность характеризуется особым состоянием системы гемостаза и иммунной системы, при котором наблюдается активация их компонентов. Гиперактивация тромбоцитов и моноцитов может являться фактором, вызывающим различные осложнения беременности, в частности, преэклампсию. При этом патогенетическая роль тромбоцитарно-моноцитарных комплексов (ТМК), которые представляют интерес в качестве диагностического маркера и в качестве терапевтической мишени, исследована недостаточно. Целью исследования было определение количественных изменений в содержании и фенотипических характеристиках ТМК периферической крови при преэклампсии, а также оценка влияния тромбоцитов на экспрессию поверхностных маркерных белков моноцитов при физиологическом и патологическом течении беременности. Исследуемые группы составили женщины в возрасте 24-42 года с диагнозом тяжелая преэклампсия (35-41 недель беременности) и женщины с неосложненной (физиологической) беременностью  (33-41 недель беременности). В общей популяции и субпопуляциях моноцитов периферической крови пациенток методами проточной цитофлориметрии определяли содержание ТМК и уровни экспрессии CD62P, CD11b, CD86, CD162, HLA-DR, TREM-1 как в составе комплексов, так и в свободно циркулирующих клетках. Установлено, что при преэклампсии уровень ТМК повышен (29,3% всей популяции моноцитов) в сравнении с беременностью, протекающей без осложнений (17,5%), и это повышение происходит за счет двух субпопуляций моноцитов, их формирующих: классических и промежуточных. При этом в ТМК отмечено повышение уровней экспрессии поверхностных антигенов CD62P, CD162, HLA-DR, CD86, TREM-1, CD11b характеризующих  активацию тромбоцитов и моноцитов. Фракции классических, промежуточных и неклассических моноцитов вносили различный вклад в изменение уровней экспрессии активационных маркеров моноцитов, связанное с преэклампсией. Сравнение ТМК и свободно циркулирующих моноцитов показало, что изменения поверхностного антигенного фенотипа моноцитов в составе ТМК обусловлены как влиянием тромбоцитов, так и другими факторами. При  преэклампсии наблюдается индуцированное тромбоцитами усиление провоспалительных и адгезионных свойств моноцитов, что проявляется  в повышение уровней экспрессии TREM-1 и CD11b в ТМК. В то же время повышение уровней экспрессии HLA-DR и CD86 в моноцитах не связано с их взаимодействием с тромбоцитами. Полученные результаты свидетельствуют о том, что преэклампсия сопровождается повышением содержания ТМК в периферической крови и активацией моноцитов в составе ТМК,  демонстрируют иммуномодуляторное влияние тромбоцитов, а также дают обоснования значимости определения паттернов экспрессии поверхностных антигенных маркеров ТМК в диагностических и терапевтических целях.

Рост частоты встречаемости бесплодия определяет актуальность исследования вклада различных клеточных факторов, в том числе клеток иммунной системы, в патогенез этой патологии. В литературе описаны изменения активации NK-клеток в децидуальной оболочке и периферической крови при бесплодии, а также представительства NKT-клеток и Т-лимфоцитов в матке при невынашивании беременности (НБ). Для NK-клеток и NKT-клеток характерна экспрессия активационного рецептора NKG2D и рецептора к Fc-фрагменту иммуноглобулинов G – CD16. Отдельные популяции Т-лимфоцитов экспрессируют NKG2D. Целью работы явился анализ экспрессии рецепторов CD16 и NKG2D NK-клетками, NKT-клетками и рецептора NKG2D Т-лимфоцитами периферической крови у женщин с бесплодием. Обследовано 60 женщин с бесплодием. Группу контроля составили здоровые небеременные фертильные женщины (n=17). Из периферической крови обследованных женщин получали мононуклеарные клетки, которые обрабатывали моноклональными антителами к CD45, CD14, CD3, CD56, CD16, NKG2D. Установлено, что у пациенток с первичным бесплодием интенсивность экспрессии рецептора NKG2D популяцией NKT-клеток периферической крови была ниже, чем у здоровых небеременных фертильных женщин. Установленное различие может быть обусловлено отсутствием в анамнезе имплантаций эмбриона у пациенток с первичным бесплодием и, соответственно, отсутствием влияния цитокинового и клеточного микроокружения, характерного для первого триместра беременности. У пациенток с вторичным бесплодием и НБ снижено относительное количество CD16+ NK-клеток и CD16+NKG2D- NK-клеток периферической крови по сравнению с этим параметром у женщин с вторичным бесплодием без НБ в анамнезе. Относительное количество CD16+ NK-клеток и CD16+NKG2D- NK-клеток периферической крови также было снижено у пациенток с вторичным бесплодием и НБ по сравнению с группой пациенток с первичным бесплодием и группой здоровых небеременных фертильных женщин. Установлено, что интенсивность экспрессии CD16 NK-клетками была снижена в подгруппе женщин с вторичным бесплодием и НБ в анамнезе по сравнению с группой контроля и подгруппой женщин с вторичным бесплодием без НБ в анамнезе. Различий к экспрессии NKG2D T-лимфоцитами при бесплодии не установлено. Сниженная экспрессия CD16 NK-клетками женщин с вторичным бесплодием и НБ может являться отражением нарушения функциональной дифференцировки NK-клеток при этой патологии.

Куриное яйцо является одним из наиболее важных источников аллергенов, сенсибилизация пациентов к которым чаще всего проявляется  в виде пищевой аллергии  (ПА) и/или атопического дерматита (АтД). Цель нашей работы состояла в сравнении частоты и интенсивности IgE-ответа на различные компоненты куриного яйца у детей в зависимости от их возраста и пола. Нами были обследованы 3070 детей  с симптомами ПА и АтД и проведен анализ уровней IgE к экстрактам аллергенов белка (f1) и желтка куриного яйца (f75) у пациентов с учетом их возраста и пола. В ходе работы была выявлена высокая частота сенсибилизации к куриному яйцу у обследованных детей, при этом частота сенсибилизации к белку была статистически значимо выше частоты сенсибилизации к желтку. Максимальная распространенность положительных IgE-ответов на белок и желток куриного яйца и выраженность сенсибилизации отмечалась у детей первого года жизни, а у детей старших возрастных групп наблюдалось значимое снижение этих показателей. В старших возрастных группах наблюдалось уменьшение числа косенсибилизированных пациентов, в то время как число случаев моносенсибилизации к белку куриного яйца возрастало в группах детей 2-6 лет, а затем снижалось у детей  старше 6 лет. У детей обоих полов частота позитивных IgE-ответов на экстракты аллергенов белка и желтка куриного яйца значимо не отличалась и имела сходную возрастную динамику. Статистически значимые различия между IgE-ответом мальчиков и девочек выявлены только в группах детей старше 14 лет и только в отношении IgE к аллергенам белка куриного яйца. Нами отмечена крайне низкая частота моносенсибилизации к желтку (0,1%). Выводы. Высокая частота сенсибилизации к куриному яйцу у детей первых лет жизни свидетельствует о крайне раннем контакте пациента с аллергеном. Иммуногенная способность аллергенов белка и желтка различна, более выраженный IgE-ответ наблюдается в  отношении белка куриного яйца. Снижение числа случаев положительного IgE-ответа на аллергены куриного яйца у детей может свидетельствовать о формировании иммунологической толерантности как к желтку, так и к белку к возрасту 8-10 лет.

В работе проведена сравнительная оценка уровней цитокинов и ростовых факторов в периферической крови у женщин с невынашиванием беременности, в том числе на фоне носительства антифосфолипидных антител. Установлено, что женщины с невынашиванием в анамнезе как без антифосфолипидных антител, так и с аутоантителами находятся в группе риска в связи с повышением содержания провоспалительных цитокинов в периферической крови; женщины с антифосфолипидными антителами и с ПВ в анамнезе являются, кроме того, группой, угрожаемой по развитию преэклампсии в связи с повышением VEGF, IL-6 и IL-8 в периферической крови. АФА независимо от уровня могут вносить свой вклад в развитие патологического процесса; у женщин с АФА выявлено нарушение баланса про- и противовоспалительных цитокинов за счет снижения компенсаторного противовоспалительного ответа. Установлено, что женщины с АФА и ПВ в анамнезе более подвержены развитию плацентарных нарушений. Определение комплекса иммунологических маркеров позволяет уточнить различные патофизиологические пути реализации акушерской патологии, в том числе невынашивания беременности. Наиболее перспективным в этом плане является поиск наиболее значимых сочетаний про- и противовоспалительных цитокинов, ростовых, в том числе ангиогенных факторов как с позитивной, так и с негативной регуляцией.

Лейомиомы матки (ЛМ), или миомы матки (ММ), представляют собой доброкачественные опухоли матки. Гипертрофическое нарастание мышечной массы при ЛМ сопровождается развитием соответствующих сосудистых сетей, которые регулируется балансом семейств проангиогенных факторов, одним из которых является VEGF-A . Кроме того, проангиогенным эффектом обладает ряд воспалительных молекул, наиболее значимые из которых IL-1b, IL-8 и др. Каждый из цитокинов или факторов роста обладает своими контрольно-регуляторными функциями. Спектр их активности может перекрываться и регулироваться другими цитокинами. Цель: оценить уровень концентрации цитокинов, принимающих активное участие в регуляции роста сосудистой сети в периферической крови пациенток с множественной миомой матки в сопоставлении с данными по группе условно здоровых женщин. Методы: В обследование вошли 178 женщин. Из них 89 женщин (23-60 лет) с миомой матки и 89 условно здоровые женщины аналогичного возраста (22 – 61 лет). Уровни TNF-α, IL-1β, IL-4, IL-6, IL-8, IL-10 и VEGF-A определялся методом ИФА с применением тест-систем «Вектор-Бест» (Россия). Оптическую плотность растворов измеряли  при длине волны 450 нм. Статистическая обработка результатов проводилась с использованием пакета прикладных программ “IBM SPSS Statistics 23” (США). Результаты: Концентрации цитокинов с провоспалительной активностью IL-6 и TNFα, а также хемокина IL-8 в сыворотке крови достоверно выше среди пациенток при сравнении со здоровыми женщинами. Концентрация VEGF в сыворотке крови, как здоровых женщин, так и у пациенток с ЛМ, представлена трехзначными значениями. Установлена достоверная зависимость содержания VEGF от количества миоматозных узлов, выявленных и удаленных оперативным путем. При множественных выявленных узлах (более двух) концентрация сывороточного VEGF достоверно выше, чем при выявлении одного узла. Согласно полученным данным, концентрация IL-6, IL-8 и TNFα в сыворотке крови пациенток со множественными миоматозными узлами также незначительно превышает значения этого показателя в группе женщин с единичными узлами (p>0,05). У здоровых женщин повышение концентрации TNF-α, прямо коррелирует с повышением сывороточных концентраций к IL-6 . Наряду с этим корреляция с концентрацией VEGF носит слабо отрицательный характер. При лейомиоме характер этих взаимосвязей сохраняется: для IL-6, IL-8, VEGF. Как среди пациенток с одиночными, так и со множественными узлами картина корреляционных отношений остается неизменной. Заключение: Полученные данные имеют практическое значение не только в качестве основы для разработки прогностических критериев развития ММ на доклиническом этапе, но и в качестве дифференциально диагностических дополнительных лабораторных признаков. В частности, при дифференциации лейомиомы матки, наиболее частой доброкачественной миоматозной опухоли матки, от злокачественных лейомиосарком матки.

Перестройка иммунной системы при беременности представляет строго контролируемый динамический процесс, в рамках  которого первый и третий триместр являются провоспалительными, тогда как второй - соответствует противовоспалительной фазе. Однако вовлеченность моноцитов в регуляцию баланса между воспалительным и противовоспалительным статусом остается мало изученной. Известно, что функциональный фенотип моноцитов зависит от их субпопуляционной принадлежности, оцениваемой по экспрессии CD14 и СD16, и сопряжен с экспрессией М1(CCR2)- и М2(CD206)-ассоциированных молекул, характеризующих, соответственно, моноциты с про- и противовоспалительной активностью. В настоящей работе методом проточной цитофлюориметрии исследована экспрессия CCR2 и CD206 в  субпопуляциях классических (CD14++CD16−, кМо), промежуточных (CD14++CD16+, пМо) и неклассических (CD14+CD16++, нМо) моноцитов у беременных на различных сроках гестации в сравнении с фертильными небеременными. В исследование были включены 60 беременных, в том числе 14 - в первом, 20 - во втором и 26 - в третьем триместре гестации, а также 29 фертильных небеременных. Однофакторный дисперсионный анализ в группах небеременных и беременных  в первом, втором и третьем триместрах выявил существенные различия в экспрессии CCR2 и CD206,  которые были наиболее выражены в классических и промежуточных моноцитах и сильнее проявлялись в отношении экспрессии CD206. В целом, моноциты беременных характеризовались сниженной экспрессией CCR2 и повышенной экспрессией CD206, что свидетельствовало о смещении баланса в сторону противовоспалительного профиля. Эти изменения проявлялись уже в первом триместре (повышенный уровень средней интенсивности флюоресценции [MFI] CD206 в кМо и пМо; p<0,05) и достигали наибольшей выраженности во втором триместре, проявляясь достоверно повышенной экспрессией  CD206 (% клеток, MFI) и сниженной экспрессией CCR2 (% клеток, MFI) во всех субпопуляциях моноцитов. В третьем триместре доля CD206+ кМо по сравнению со вторым триместром снижалась (p<0,05), а относительное содержание CCR2+ клеток в кМо  и пМо  повышалось. Характерно, что в первом и третьем  триместрах выявленные изменения сочетались с усилением   провоспалительного профиля моноцитов, которое в первом триместре было рестриктировано субпопуляцией неклассических  моноцитов (возрастание MFI CCR2), а в третьем триместре опосредовалось промежуточными  и неклассическими  моноцитами (возрастание  ССR2+ клеток, в том числе за счет экспансии ССR2+СD206+ коэкспрессирующих клеток). Полученные данные свидетельствуют о вовлеченности моноцитов в регуляцию про- и противовоспалительного баланса в динамике гестации с преобладающим формированием М2 профиля  в классических  моноцитах  в  первом и третьем триместрах и всех  субпопуляциях  моноцитов во 2-ом триместре и  усилением М1 провоспалительного профиля в промежуточных  и неклассических  моноцитах в первом и третьем триместрах.

Существует прямая взаимосвязь между выраженностью функционального, морфологического и биохимического атипизма клеток опухоли и степенью ее злокачественности. Выделяют пять молекулярно-генетических подтипов рака молочной железы. По литературным данным известно, что наиболее агрессивным течением характеризуются нелюминальные подтипы, в особенности – тройной негативный рак молочной железы. Целью работы явилось определение сопряженности между относительным содержанием клеток различной степени дифференцировки с продукцией цитокинов биоптатами рака молочной железы при люминальных и нелюминальных подтипах рака молочной железы. Материалом исследования служили биоптаты 49 женщин с инвазивной карциномой молочной железы неспецифического типа, средний возраст которых составил 59 лет. Пациенты были разделены на три группы в зависимости от принадлежности к тому или иному молекулярно-генетическому подтипу опухоли: 12 человек с люминальным подтипом А (группа I), 30 – с люминальным подтипом В (группа II) и 7 – с нелюминальным (группа III). Для определения цитокинпродуцирующего резерва биоптатов изучали спонтанную и стимулированную поликлональными активаторами продукцию цитокинов IL-2, IL-6, IL-8, IL-10, IL-17, IL-18, IL-1β, IL-1Ra, TNFα, IFNγ, G-CSF, GM-CSF, VEGF-А, MCP-1. Значение цитокинпродуцирующего резерва биоптатов выражали с помощью индекса влияния поликлональных активаторов. Относительное содержание опухолевых клеток различной степени дифференцировки в образцах инвазивной карциномы неспецифического типа оценивали с помощью светооптической микроскопии с учетом Ноттингемской градирующей системы. Установлено, что пациенты с нелюминальным подтипом (III группа) отличаются более высокой спонтанной и стимулированной поликлональным активатором продукцией IL-IRa по сравнению с группами женщин с люминальными подтипами (I и II группы). Группы I и III характеризовались более высокой спонтанной продукцией IL-10 и G-CSF по сравнению с группой II. При оценке влияния поликлонального активатора на продукцию G-CSF в группах I и III также отмечается достоверно более высокая продукция этого цитокина по сравнению с группой II. Показатели индекса влияния поликлонального активатора на продукцию G-CSF и GM-CSF снижены в группе III по сравнению с группой II, что указывает на истощение резерва продукции этих цитокинов у пациентов с нелюминальным подтипом рака молочной железы. ИВПА на продукцию VEGF-A напротив повышен у пациентов третьей группы по сравнению с группой II. При сравнении продукции цитокинов между люминальными подтипами рака молочной железы (группа I и II) выявлены достоверные различия по спонтанной продукции MCP1 и стимулированной поликлональным активатором продукции IL-10, G-CSF, а также по индексу влияния поликлонального активатора на продукцию IL-2, IL-17, IFNγ. При оценке относительного содержания низкодифференцированных клеток, достоверно больший процент отмечается в группе III по сравнению с другими. При анализе сопряженности между относительным содержанием клеток различной степени дифференцировки и продукцией цитокинов в исследуемых группах, были выявлены определенные корреляционные связи. В частности в группе I установлены обратные корреляционные связи между спонтанной продукцией VEGF-А и IL-6 и относительным содержанием низкодифференцированных клеток, а также положительная корреляционная связь между процентом высокодифференцированных клеток и стимулированной поликлональным активатором продукцией IFNγ. При оценке индекса влияния поликлонального активатора на продукцию G-CSF обнаружена обратная зависимость с процентом высокодифференцированных клеток. Выявлены 5 вариантов корреляционных связей между спонтанной продукцией IL-2, IL18, IL-Iβ, IL-IRa, G-CSF и относительным содержанием низко- и умереннодифференцированных клеток, 5 вариантов между стимулированной поликлональным активатором продукцией IL-2, IL-18, GM-CSF и процентом умеренно- и низкодифференцированных в группе II. При оценке индекса влияния поликлонального активатора в этой группе пациентов обнаружены прямые корреляционные связи между относительным содержанием умереннодифференцированных клеток и IL8, IL-IRa и G-CSF. В группе III выявлена обратная зависимость между спонтанной продукцией IL-Iβ и процентом умереннодифференцированных клеток, 3 отрицательные корреляционные связи между стимулированной поликлональным активатором продукцией IL-6, IL-8 и IFNγ с относительным содержанием умереннодифференцированных клеток и отрицательная связь между индексом влияния поликлонального активатора на IL-17 и процентом умереннодифференцированных клеток. Анализ ROC-кривых показал хорошее качество и оптимальные значения точек отсечения концентраций цитокинов и относительного содержания низкодифференцированных клеток, которые могли бы наилучшим образом предсказать наличие неблагоприятных нелюминальных подтипов рака молочной железы. Основываясь на полученных нами данных, можно сделать вывод о том, что цитокинпродуцирующий резерв сопряжен с клеточной дифференцировкой, а также зависит от молекулярно-генетического подтипа опухоли. 

В период пандемии COVID-19 множество вопросов, связанных с особенностями иммунного ответа на перенесенное заболевание, вакцинацию, развитие пост-ковидного синдрома или его атипичных форм, остались не вполне разрешенными. Также не определены оптимальные и эффективные стратегии вакцинации против респираторных вирусных инфекций в «эру постковида». Разнообразие вакцин, прививочный анамнез, факторы риска, а также присоединение COVID-19 к спектру сезонных инфекций, в значительной степени влияют на исходный иммунологический профиль различных групп населения. Материалы и методы. Исследуемая группа – 80 юношей в возрасте 19 лет, проживающих в закрытых коллективах. Забор крови производился в 2022 г., через 9 месяцев после курса вакцинации препаратом «Спутник V». В сыворотках венозной крови проводились исследования уровня про- и противовоспалительных цитокинов (IL1β, IL4, IL6, IL8, IL10, IL17, IFNg, TNFα), а также антител IgM и IgG к SARS-CoV-2. Результаты обрабатывались при помощи Microsoft Excel, R-Statistics, SPSS 22. Нормальность распределения количественных данных оценивалась по критерию Колмогорова-Смирнова. Количественные данные представлены в виде Me [Q₂₅; Q₇₅], качественные – в виде n (%). Для определения статистической значимости использовался коэффициент корреляции Спирмена. Результаты. Средний уровень IgG к SARS-CoV-2, через 9 мес. после вакцинации превышал заявленный защитный уровень более чем в 3 раза. При сравнении уровней цитокинов в зависимости от уровня антител IgG к SARS-CoV-2 были получены разноплановые данные. В группе 1 с IgG к SARS-CoV-2, не достигавшими рекомендованного защитного уровня (<150 BAU/мл), уровни исследованных провоспалительных цитокинов (IL1β, TNFα, IL6, IL8) были в 2 и более раз выше, чем в группе 2 с IgG к SARS-CoV-2 от 150 до 500 BAU/мл. При этом уровень противовоспалительного цитокина IL10 был в 5 раз выше в 1 группе по сравнению со 2 группой. Значительно выше (в 4 раза) уровень IL10 был и в группе 3 с IgG к SARS-CoV-2 от 500 и более BAU/мл. Заключение. По нашему мнению существует множество факторов, влияющих на иммунный ответ, что требует персонализированного подхода к вакцинации с учетом исходного иммунного состояния. Для оптимизации повторной вакцинации необходимо учитывать предыдущие уровни антител, а также использовать иммунологические показатели для оценки необходимости дополнительных доз.

Актуальность. По данным Отдела народонаселения ООН, к 2050 году 25% населения будет старше 65 лет из-за увеличения средней продолжительности жизни. Заболеваемость и смертность по причине гриппа непропорционально высоки среди пожилых людей. В Европейском регионе ВОЗ в 2004–2017гг., самая высокая доля вируса гриппа A(H3N2) была отмечена в возрастной группе ≥ 65 лет — 10%. Эффективность вакцинации против гриппа снижается у лиц в возрасте старше 65-70 лет вследствие возрастной иммунной дисфункции (иммуностарения). Снижение эффективности вакцины против гриппа с возрастом может быть связано с дисбалансом эффекторных Т-клеток памяти и регуляторных реакций. В США предпочтительно рекомендуют использование высоких доз вакцин против гриппа или адъювантных вакцин по сравнению со стандартными дозами неадъювантных вакцин против гриппа для людей 65 лет и старше. В этой возрастной группе эти вакцины потенциально более эффективны в отношении количества госпитализаций и в экономическом отношении, чем неадъювантные вакцины против гриппа в стандартных дозах. Цель данного исследования – изучить способность к формированию защитного титра антител к штаммам вируса гриппа, входящим в состав вакцины, на этапе завершения пандемии COVID-19 у пожилых людей. Материалы и методы. Всего в исследовании принял участие 31 участник в возрасте старше 60 лет, который был иммунизирован гриппозной четырехвалентной инактивированной субъединичной адъювантной вакциной внутримышечным способом введения. Антитела к штаммам вируса гриппа определяли методом постановки реакции торможения гемагглютинации (РТГА) через месяц после введения. Результаты. Для лиц старше 60 лет через 1 месяц после вакцинации статистически значимое увеличение уровня серопротекции (p < 0,05) наблюдается по отношению к трем штаммам: А/Виктория/2570/2019(H1N1) pdm09 до 74,2%, A/H3N2/Дарвин/9/2021 до 93,2% и В/Австрия/1359417/2021 до 74,2%. Уровень серопротекции к штамму В/Пхукет/3073/13 составил 35,5%. Средний геометрический титр антител (СГТ) лиц старшей возрастной группы до вакцинации по штамму Н1N1 составлял 15,1 (log2  3,91 ± 0,59), после вакцинации – 73,7 (log2  6,20 ± 0,93); по штамму H3N2 – 52,7 (log2  5,72 ± 0,97) и 147,4 (log2  7,20 ± 1,22) до и после соответственно; по штамму В/Ямагата – 8,6 (log2  3,11 ± 0,54) и 24,1 (log2  4,59 ± 0,79) до и после соответственно; по штамму В/Виктория СГТ составлял 10,1 (log2  3,33 ± 0,38), после – 63,0 (log2  5,98 ± 0,69). Фактор сероконверсии (ФСК) достоверно превысил требуемый уровень 2,00 для всех штаммов (р < 0,05). Для обоих штаммов H3N2 и В/Ямагата ФСК составил 2,8, для штаммов Н1N1 и В/Виктория – 4,89 и 6,26 соответственно. Уровень сероконверсии для штаммов H3N2 и В/Ямагата составил 41,9%, для штамма H1N1 – 61,3%, для штамма В/Виктория – 77,4%. Выводы. Иммуногенность каждого компонента гриппозной вакцины при однократной внутримышечной иммунизации добровольцев в возрасте старше 60 лет соответствовала как минимум одному критерию требований, предъявляемых к инактивированным гриппозным вакцинам.

Мононуклеарные клетки пуповинно-плацентарной крови человека (МКППКЧ) применяются в качестве основной или вспомогательной терапии для лечения порядка 80 различных нозологий, что связано с их высокой пролиферативной активностью, низкой иммуногенностью и возможностью подбора редких HLA-типов трансплантатов для этнических меньшинств. В этой связи оценка безопасности клеточного материала в отношении иммунной системы является актуальной. Цель: изучить аллергенное и иммунотоксическое действие мононуклеарных клеток пуповинно-плацентарной крови человека в рамках доклинических испытаний на животных. Материалы и методы: 1. Изучение гиперчувствительности I типа к МКППКЧ проводилосперевод на англь по стандартной методике оценки бронхиолоспазма на трахее самцов и самок морских свинок. Образцы участков трахеи инкубировали в растворе Рингера-Тироде с конечной концентрацией суспензии мононуклеарных клеток 2,5 %, позитивный контроль – гистамина гидрохлорид. 2. Определение антител к МКППКЧ осуществлялось на самцах мышей линии CBAxC57B2/6 по реакции связывания комплемента (индикация – отсутствие гемолиза эритроцитов барана). Мышам однократно внутривенно вводили клеточный материал в 10, 50 и 100-кратной дозировке от терапевтической для человека (8,57∙10⁷, 4,28∙10⁸, 8,57∙10⁸ клеток/кг массы тела, соответственно); кровь для анализа отбирали через 21 день после введения биоматериала. Позитивный контроль – сыворотка мышей, иммунизированных St. aureus. 3. Исследование фагоцитарной активности нейтрофилов проводилось на самцах и самках крыс линии Wistar, которым однократно внутривенно вводили МКППКЧ из расчета 100-кратной терапевтической дозировки. Через 30 дней проводили исследование фагоцитарного индекса и фагоцитарного числа методом тест-туши, анализируя по 600 клеток на каждую группу. Рассчитывали медиану, верхний и нижний квартили (Ме (С₂₅-С₇₅)); сравнение гипотез проводили по U-критерию Манна-Уитни. Результаты: в ответ на введение МКППКЧ анафилактогенной активности и выработки антител к клеточному материалу в экспериментах на животных не выявлено. У самок крыс статистически значимо (р = 0,004) возросла фагоцитарная активность нейтрофилов относительно контрольных животных (56,5 (53,8-60,8) и 44,0 (40,5-47,5), соответственно); у самцов крыс отмечена тенденция к увеличению фагоцитарной активности на 13 % (р = 0,054). Фагоцитарный индекс во всех сравниваемых группах остался в зоне флуктуаций нормативных величин 1,8 – 2,0. Заключение: мононуклеары пуповинно-плацентарной крови человека не обладают анафилактогенным, а в 100-кратной от терапевтической дозировки (8,57∙10⁸ кл./кг) – иммунотоксическим действием, но способствуют росту фагоцитарной активности нейтрофилов, что требует дальнейших доклинических и клинических испытаний эффективности и безопасности применения биоматериала с высоким лечебным потенциалом.

Характер и интенсивность реакции иммунной системы организма человека на заражение вирусом SARS-CoV-2 зависят от многих факторов. Иммунный ответ на инфекцию включает клеточное и гуморальное звено. Гуморальное звено состоит из эффекторных специфических (антитела), неспецифических (белки острой фазы, прокальцитонин (PCT), α- и β-интерфероны) и регуляторных факторов, таких как цитокины (интерлейкины (IL), γ-интерферон (IFNγ)) и медиаторы (лейкотриены и т. д.). В данном исследовании изучались сывороточные уровни цитокинов (IFNγ, IL-2,-6,-8,-10,-17А,-18) и неспецифический эффекторный фактор иммунной системы PCT при разной степени тяжести заболевания COVID-19.

Биоматериал (сыворотка крови) 91 пациента (15 женщин, 76 мужчин) в возрасте 29-88 лет (средний возраст 53,9 года) собирался в период с мая 2020 по июль 2021 г. Пациенты были распределены на группы по степени тяжести заболевания, в зависимости от клинических данных, потребности в кислороде, данных о госпитализации: больные COVID-19 легкой степени тяжести (n=9) – пациенты на амбулаторном лечении; больные средней степени тяжести (n=38) – пациенты коечного отделения инфекционного стационара; больные тяжелой степени тяжести (n=44) – пациенты инфекционного отделения реанимации и интенсивной терапии; контрольная группа пациентов (n=20) – доноры крови без хронических заболеваний.

В результате исследования были выявлены наиболее важные маркеры тяжести состояния, с помощью ROC-анализа рассчитаны пороговые значения для дифференциальной диагностики разных степеней тяжести по достоверно различающимся критериям, диагностической эффективности показателей медиаторов иммунитета в разработанной логистической регессивной модели.

Нами были обнаружены и статистически подтверждены показатели, наиболее достоверно влияющие на степень тяжести при COVID-19 – IL-6,-8,-10,-18, PCT, IFNγ; максимальный рост IL-17А и IFNγ – при легкой степени и снижение – в средней и максимально в тяжелой степени COVID-19. Факторами плохого прогноза являлись повышение IL-6,-10, PCT, снижение IFNγ. Обнаружены корреляционные связи медиаторов иммунного ответа (IL-8,-17А,-18, IFNγ), позволяющие глубже понимать механизм развития нарушений, дисбаланса иммунного ответа.

Геморрагическая лихорадка Ласса – острое инфекционное заболевание человека с высокой летальностью и пандемическим потенциалом. Болезнь эндемична для стран Западной Африки, где повсеместно распространен основной резервуар вируса Ласса – мыши Mastomis natalensis. Геморрагическая лихорадка Ласса ежегодно уносит жизни тысяч людей. На сегодняшний день в мире нет одобренных средств для специфической терапии или профилактики заболевания. Целью данной работы было конструирование, изучение иммунобиологических свойств и доклинической безопасности кандидатной вакцины для профилактики геморрагической лихорадки Ласса на основе рекомбинантных аденовирусных векторов. В ходе работы использовались стандартные генно-инженерные, молекулярно-биологические, вирусологические методы и методы работы с лабораторными животными. В результате работы была сконструирована и охарактеризована комбинированная векторная кандидатная вакцина для профилактики геморрагической лихорадки Ласса – ГамЛассаВак. Вакцина представлена двумя компонентами для гетерологичной иммунизации в режиме прайм-буст на основе рекомбинантных репликативно-дефектных аденовирусных векторов. Первый компонент вакцины – рекомбинантный аденовирус человека 26 серотипа, второй компонент – аденовирус человека 5 серотипа. Оба рекомбинантных вектора несут кодон-оптимизированную последовательность гликопротеина вируса Ласса. В GMP-условиях произведены и проанализированы две экспериментальные серии кандидатной вакцины. Приведены результаты исследований экспериментальных серий на соответствие требованиям, предъявляемым к вирусным векторным вакцинам. В доклинических исследованиях на мышах показана индукция антиген-специфических IgG при введении компонентов вакцины индивидуально и в режиме прайм-буст, а также динамика развития гуморального иммунного ответа на 42, 77, 119 и 147 дни после вакцинации. При этом, несмотря на 100% сероконверсию, вируснейтрализующие антитела не были обнаружены ни в одном из образцов, полученных от иммунизированных мышей. В исследовании биораспределения показано, что через 24 часа после внутримышечного введения компонентов кандидатной вакцины ДНК аденовирусных векторов детектируется только в месте инъекции и региональных лимфатических узлах. В результате доклинических исследований безопасности (острая токсичность, хроническая токсичность, иммунотоксичность, аллергизирующие свойства, репродуктивная токсичность) не выявлено противопоказаний для получения разрешения на клинические исследования кандидатной вакцины. В совокупности результаты демонстрируют, что кандидатная вакцина для профилактики геморрагической лихорадки Ласса на основе рекомбинантных аденовирусных векторов 26 и 5 серотипов является перспективным препаратом для специфической иммунопрофилактики.

Резюме. Феномен холодовой гиперреактивности дыхательных путей весьма распространен среди больных бронхиальной астмой. Возможное участие иммунных механизмов в ее формировании недостаточно изучено. В частности, отсутствует информация о взаимодействии Th17-связанных цитокинов с цитокинами Th2 иммунного ответа, сопровождающими воспаление у больных бронхиальной астмой при холод-индуцированном бронхоспазме. Цель. Оценить содержание интерлейкинов IL-17A, IL-6, IL-22, IL-4 и IL-13 у больных бронхиальной астмой и их роль в формировании холодовой гиперреактивности дыхательных путей. Материалы и методы. У 41 больного бронхиальной астмой проводили измерение спирометрических показателей форсированного выдоха, оценивали содержание интерлейкинов в сыворотке крови до и после проведения бронхопровокационной пробы с 3-минутной изокапнической гипервентиляцией холодным (-20°С) воздухом. Результаты. Сформированы 2 группы пациентов с наличием (1 группа, n=14) и отсутствием (2 группа, n=29) холодовой гиперреактивности дыхательных путей, верифицируемой по степени падения объема форсированного выдоха за 1 сек. (∆ОФВ_1игхв) после холодовой пробы (-16,5[-20,0;-12,0] и -2,3[-3,5;-0,8] %, соответственно; р<0,0001). У больных 1 группы по отношению ко 2 группе регистрировались более низкие исходные значения ОФВ₁ (88,1±3,1 и 96,6±2,2%, р=0,044) и средней объемной скорости выдоха на уровне 25-75 % жизненной емкости легких (СОС_25-75 62,4±3,87 и 75,6±3,7%, р=0,013). Кроме того, исходное содержание IL-17A, IL-6, IL-4 у лиц с холодовой гиперреактивностью дыхательных путей было значимо выше, чем у больных, не реагировавших на холодный воздух. Прослеживалась корреляционная связь между содержанием IL-17А в крови и выраженностью реакции бронхов (DОФВ_1игхв) на холодовую пробу (Rs=-0,33; р=0,049). Выводы. У больных бронхиальной астмой с холодовой гиперреактивностью дыхательных путей высокое содержание IL-17A, IL-6 и IL-4 свидетельствует об участии в регуляции холод-индуцированного бронхоспазма и иммунного ответа как Th2, так и Тh1/Тh17 цитокинов с формированием иммунного воспаления «Th2 низкого» подтипа.

Привычное невынашивание беременности представляет собой существенную клиническую проблему, которая затрагивает 1-5% популяции, при этом в более чем половине случаев причина преждевременной потери беременности остается неизвестной. Одной из возможных причин является нарушение баланса в системе гемостаза матери, приводящее к тромбозу маточно-плацентарных сосудов, снижению перфузии плаценты и гипоксии. Изменения морфофункциональных свойств моноцитов и образуемых ими и активированными тромбоцитами агрегатов  могут являться факторами, приводящими к различным осложнениям беременности, в частности, к невынашиванию. Однако, роль тромбоцитарно-моноцитарных комплексов (ТМК), которые представляют интерес в качестве диагностического маркера и в качестве терапевтической мишени, в патогенезе привычного невынашивания беременности практически не изучена. Целью исследования было определение количественных изменений в содержании и фенотипических характеристиках ТМК периферической крови при привычном невынашивании беременности, а также оценка влияния тромбоцитов на экспрессию поверхностных маркерных белков моноцитов при физиологическом и патологическом развитии беременности. Исследуемые группы составили женщины в возрасте 24-42 года с диагнозом привычный выкидыш, имеющие текущую беременность сроком 6-12 недель и женщины с неосложненной (физиологической) беременностью сроком 7-12 недель. В общей популяции и субпопуляциях моноцитов периферической крови пациенток методами проточной цитофлориметрии определяли содержание ТМК и уровни экспрессии поверхностных антигенов тромбоцитов и моноцитов: CD62P, CD11b, CD86, CD162, HLA-DR, TREM-1. Установлено, что при привычном невынашивании уровень ТМК повышен (26,5%) в сравнении с беременностью, протекающей без осложнений (15,3%), и это повышение происходит с участием всех трех субпопуляций моноцитов: классических, промежуточных и неклассических. При этом на уровне общей популяции моноцитов в ТМК отмечалось снижение уровня экспрессии HLA-DR и повышение уровня экспрессии CD11b, тогда как экспрессия CD62P, CD162, CD86 и TREM-1 существеннно не изменялась. Субпопуляции моноцитов вносили различный вклад в изменение уровней экспрессии активационных маркеров моноцитов, связанное с привычным невынашиванием, и эти изменения не всегда проявлялись на уровне всей популяции моноцитов. Сравнение ТМК и свободных моноцитов  показало, что изменения поверхностного фенотипа моноцитов в составе ТМК обусловлены как влиянием тромбоцитов, так и другими факторами. При  привычном невынашивании наблюдалось индуцированное тромбоцитами усиление адгезионных свойств моноцитов, что проявлялось  в повышение уровня экспрессии CD11b. В то же время снижение уровня экспрессии HLA-DR в моноцитах не было связано с их взаимодействием с тромбоцитами. Полученные результаты свидетельствуют о том, что привычное невынашивание беременности сопровождается повышением содержания ТМК в периферической крови и изменениями антигенного фенотипа моноцитов в составе ТМК, демонстрируют иммуномодуляторное влияние тромбоцитов, а также дают обоснования значимости определения паттернов экспрессии поверхностных антигенных маркеров ТМК в диагностических и терапевтических целях.

На протяжении тысячелетий человечество пытается бороться с возбудителем туберкулеза - Mycobacterium tuberculosis, но показатели заболеваемости и смертности, к сожалению, остаются по-прежнему высокими во всем мире. Целью исследования данной работы было выявить изменения иммуногистохимических параметров в разных зонах легких при туберкулеме стабильного течения. Нами изучено 30 случаев туберкулем стабильного течения у мужчин. Исследование проводили в 2 зонах: капсуле туберкулемы и прилежащих к ней областях (перифокальных зонах). Группой сравнения служили резецированные участки верхних долей правого легкого, взятые у 10 мужчин, погибших в ДТП, прижизненно не болевших туберкулезом. Эта группа была названа «условно-здоровые». Для оценки местного иммунного ответа использовали иммуногистохимический метод с использованием моноклональных антител к CD8, CD4, CD79a, Fascin. При оценке локализации экспрессии изучаемых маркеров в легких в группе «условно-здоровые» число CD4+ и CD8+-клеток определялось преимущественно в интерстициальном пространстве. Число CD4+ клеток в данной исследуемой группе преобладало над CD8+ клетками. CD79а+ и Fascin+ клетки в данной изучаемой группе были обнаружены в интерстициальном пространстве в единичном числе. В стабильной туберкулеме было выявлено большее число лимфоцитов в капсуле с преобладанием Т-киллеров над Т-хелперами. В перифокальной зоне стабильной туберкулемы число иммунных клеток было уменьшенным по сравнению с группой «условно-здоровые», но при этом определялись зоны, где CD4-положительные лимфоциты образовывали контакты с интерстициальными макрофагами. Число CD79а положительных клеток преимущественно определялось в соединительнотканной капсуле туберкулемы, единичные - на периферии, рядом с макрофагами.   Fascin положительные клетки как в капсуле, так и перифокальной зоне стабильной туберкулемы встречались редко, в основном они локализовались вокруг кровеносных сосудов. При изучении корреляционных взаимодействий в группе «условно-здоровые» выявлена умеренная положительная связь между цитотоксическими лимфоцитами и Т-хелперами. В зоне капсулы стабильной туберкулемы сильные положительные связи обнаружены в парах CD4+/ CD79а и CD79а/ CD8+, в периферической зоне легких прослеживаются связи только между CD79а/CD8+. Таким образом, степень активности туберкулезного процесса в капсуле и перифокальной зоне туберкулемы легких стабильного течения связана с разными клеточными взаимодействиями, осуществляющими двойной контроль как со стороны клеточного, так и гуморального звеньев иммунной системы.

Развитие язвенного колита (ЯК) сопровождается активацией пуринэргического сигнального пути и повышением уровня внеклеточного аденозина. Аденозин участвует в регуляции баланса провоспалительных Т-хелперов типа 17 (Th17) и иммуносупрессорных регуляторных Т-клеток (Treg), нарушение которого, как считается, является одним из основных иммунных факторов данного заболевания.  Тем не менее, вопрос о том, как изменяется экспрессия генов, кодирующих транскрипционные факторы Treg клеток и Th17 (FOXP3 и RORγ соответственно), и генов, кодирующих участников CD39/CD73/A2AR сигнального пути (ENTPD1,  NT5E, ADORA2A), в периферической крови больных ЯК мало изучен. Цель исследования - изучить уровень экспрессии генов ENTPD1,  NT5E,  ADORA2A, FOXP3 и RORγ при язвенном колите. Обследовано 41 человек, из которых 23 пациента с диагнозом ЯК (18 пациентов, находящихся на базисной терапии производными 5-АСК (группа ЯК1) и 5 пациентов, принимающих преднизолон (группа (ЯК2)), 18 условно здоровых людей. Тотальную РНК выделяли из лейкоцитов периферической крови (ЛПК). Уровень транскриптов генов изучали методом ПЦР в режиме реального времени. Содержание мРНК гена ENTPD1 у больных ЯК, находящихся на базисной терапии производными 5-АСК, был выше, чем у здоровых людей. Уровень транскриптов гена NT5E и ADORA2Aв ЛПК пациентов группы ЯК1 оказался выше, чем у пациентов из группы ЯК2 и здоровых индивидов. У группы пациентов ЯК1 содержание мРНК гена FOXP3 в ЛПК было выше, чем у условно здоровых людей. Уровень экспрессии гена RORγ в ЛПК пациентов из групп ЯК1 и ЯК2 был выше, чем у здоровых индивидов.

Целью данной работы было исследование способности Т-клеток, иммунных к SARS-CoV-2 людей, продуцировать γ-IFN, являющийся одним из маркеров Т-клеточного иммунитета, в ответ на стимуляцию пептидным пулом в цельной крови.

Материалы и методы. Исследовали образцы цельной крови 80 добровольцев с известным анамнезом, полученные в 2021 году и 258 добровольцев, полученные в сентябре-октябре 2022 года. В данном исследовании использовали 2 метода - 1) твердофазный иммуноферментный анализ для определения антител класса G к RBD SARS-CoV-2, 2) IGRA-тест, для определения γ-IFN, вырабатываемого антиген-специфическими лимфоцитами в ответ на их стимуляцию вирусным антигеном.

Результаты. Параметры IGRA-теста были оптимизированы на выборке из 80 образцов добровольцев. Было определено пороговое значение уровня γ-IFN (4.85 пг/мл), диагностическая специфичность –100% (80,6-100%); диагностическая чувствительность –92,19% (83-96,62%), ДИ 95%.

Затем было проведено исследование выборки из 258 добровольцев, у 28,7% которых по результатам IGRA-теста превышения порогового уровня γ-IFN после стимуляции выявлено не было, при этом у всех добровольцев были обнаружены антитела класса G к RBB SARS-CoV-2.  Корреляции между уровнем антител и уровнем интерферонового ответа во всей группе выявлено не было. При сравнении уровней антител IgG и амплитуды превышение уровня IFN-γ над базовым уровнем у групп выборки, отличающихся временем последней вакцинации медианные значения параметров были незначительно выше для части выборки, прошедшей ревакцинацию за 1-2 месяца до проведения исследования, при этом достоверная разницы между двумя выборками была выявлена только при оценке γ-IFN, пг/мл (критерий Манна-Уитни, р=0,0321).

Заключение. По результатам исследования можно предположить, что все пациенты выборки, прошедшие вакцинацию и перенесшие инфекцию COVID-19, имели гуморальный иммунитет, но примерно у трети из них отсутствовал клеточный иммунитет к SARS-CoV-2. Корреляции между уровнем антител и уровнем интерферонового ответа выявлено не было (критерий Спирмена). Показано, что ревакцинация в предшествующие 1-2 месяца способствовала увеличению амплитуды интерферонового ответа.

Резюме

Методы иммунокоррекции, основанные на введении в организм аутологичных лейкоцитов, активированных в условиях in vitro различными иммуномодуляторами, получают все более широкое распространение. Ранее проведенные нами исследования позволяют утверждать об эффективности применения иммунотерапии лимфоцитами, активированными in vitro с помощью цитокинов для лечения онкологических больных и хорошей переносимости данной терапии. В данной статье рассмотрены варианты применения препаратов рекомбинантного интерферона гамма (IFN-γ) и рекомбинантного фактора некроза опухоли-альфа-тимозина-альфа1 (TNF-α-Т) для получения цитокин-индуцированных киллеров (ЦИК) человека in vitro Целью исследования являлась оценка возможности применения препаратов IFN-γ и TNF-α-Т в протоколах получения ЦИК человека в условиях in vitro. Материалы и методы. Мононуклеары (МНК), выделенные из крови 15 доноров, культивировали в условиях СО₂-инкубатора до 12 суток. Для оценки токсичности IFN-γ и TNF-α-Т в отношении лимфоцитов in vitro концентрации препаратов были выверены экспериментальным путем с учетом контроля уровня жизнеспособности клеток. Уровни цитокинов в супернатантах на этапах культивирования клеток определяли методом иммуноферментного анализ (ИФА). До и после культивирования оценивали наличие адгезии и гранулярности изучаемых лимфоцитов, фенотип клеток изучали методом проточной цитометрии, оценку уровня жизнеспособности активированных лимфоцитов проводили в камере Горяева. Результаты. Проведен сравнительный анализ способов культивирования лимфоцитов в различных средах, содержащих: только IFN-γ (группа 1); IFN-γ, интерлейкин-2 (IL-2) и интерлейкин-15 (IL-15) (группа 2); только TNF-α-Т (группа 3); TNF-α-Т, IL-2 и IL-15 (группа 4) и только IL-2 и IL-15 (группа контроля). При активации МНК  в среде, содержажей IFN-γ, IL-2 и IL-15 или в среде, содержащей TNF-α-Т, IL-2 и IL-15, отмечена общая тенденцию к значительному увеличению показателей Т-цитотоксических клеток (CD3+CD8+), NKТ-клеток (CD3+CD16+CD56+), активированных лимфоцитов (HLA-DR+), активированных Т-лимфоцитов (CD3+HLA-DR+), и маркеров активации на всех лимфоцитах (CD38+) и на Т-клетках (CD3+CD38+). Заключение. Оценена возможность применения препаратов IFN-γ и TNF-α-Т для получения ЦИК человека in vitro. Полученные данным способом активированные цитотоксические лимфоциты могут применяться для фундаментальных исследований по выявлению новых закономерностей и морфо-функциональных особенностей активированных лимфоцитов человека, а также для проведения адоптивной иммунотерапии онкологическим больным.

Abstract

Methods of immunocorrection based on the introduction into the body of autologous leukocytes activated in vitro by various immunomodulators are becoming increasingly widespread. Our previous studies suggest that the use of immunotherapy with lymphocytes activated in vitro using cytokines is effective for the treatment of cancer patients and that this therapy is well tolerated. This article discusses the use of drugs: recombinant interferon-gamma (IFN-γ) and recombinant tumor necrosis factor-alpha-thymosin-alpha1 (TNF-α-T) for the production of human cytokine-induced killers (CIK) in vitro. The purpose of the study was to assess the possibility the use of IFN-γ and TNF-α-T drugs in protocols for obtaining human CIK in vitro. Materials and methods. Isolated mononuclear cells from 15 donors were cultured in a CO2 incubator for 12 days and the morpho-functional characteristics of lymphocytes were studied. To assess the toxicity of IFN-γ and TNF-α-T towards lymphocytes in vitro, the concentrations of the drugs were adjusted experimentally, taking into account the control of the level of cell viability. The levels of cytokines in the supernatants at the stages of cell culture were determined by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). Before and after cultivation, the presence of adhesion and granularity of the studied lymphocytes was assessed, the phenotype of the cells was studied by flow cytometry, and the level of viability of activated lymphocytes was assessed in a Goryaev chamber. Results. A comparative analysis of methods for cultivating lymphocytes in different cultures was carried out. We studied media containing: only IFN-γ (group 1); IFN-γ, interleukin-2 (IL-2) and interleukin-15 (IL-15) (group 2); TNF-α-T only (group 3); TNF-α-T, IL-2 and IL-15 (group 4) and only IL-2 and IL-15 (control group). When mononuclear cells are activated in a medium containing IFN-γ, IL-2 and IL-15 or in a medium containing TNF-α-T, IL-2 and IL-15, there is a general tendency towards a significant increase in T-cytotoxic cells (CD3 +CD8+), NKT cells (CD3+CD16+CD56+), activated lymphocytes (HLA-DR+), activated T lymphocytes (CD3+HLA-DR+), and activation markers on all lymphocytes (CD38+) and on T cells ( CD3+CD38+). Conclusion.  The possibility of using IFN-γ and TNF-α-T to obtain human CIK in vitro was assessed. Activated cytotoxic lymphocytes obtained by this method can be used for fundamental research to identify new patterns and morpho-functional characteristics of activated human lymphocytes, as well as for adoptive immunotherapy for cancer patients.

Вакцинация против гриппа способствует благоприятному течению и исходу COVID-19. Цель исследования - изучить влияние вакцин против гриппа и пневмококка на уровень IgG антител (АТ) к SARS-CoV-2 среди   медицинского персонала в начале пандемии COVID-19.

Представлена оценка иммунного ответа к вирусу гриппа и SARS-CoV-2 у 266 медицинских работников через 6 мес. после иммунизации против гриппа и/или против пневмококковой инфекции (без прививок против COVID-19) в сезоне 2020-2021 гг со сравнительной характеристикой у 281 сотрудников не имеющие в анамнезе вакцинаций.

Установлено, что что доля медицинских работников с защитным (≥1:40) уровнем к вирусу гриппа через 6 месяцев после вакцинации по группам участников достигает протективного (≥70%) значения только у лиц получавших моновакцину против пневмококковой инфекции (78,6%) в сравнении с лицами которые были привитыми моновакциной против гриппа (61,7%) (p <0,001), а также с группой работников иммунизированных против гриппа в сочетания с вакциной против S. pnevmoniae  (68,9%) (p <0,01). То есть, вакцина против пневмококка способно индуцировать синтез IgG-АТ к вирусу гриппа достигающих протективных значений.

Анализ результатов серопозитивных (≥1:10) IgG-АТ к штаммам вируса гриппа и их сопоставимости с серопревалентными к COVID-19 лиц показал, что среди медицинского персонала, вакцинированного против сезонного гриппа через 6 месяцев доля серопозитивных лиц (свидетельствующая о вероятной перенесенной бессимптомной формы COVID-19) выше и составляет от 65,4% (p =0,026) в гр. привитых моно-гриппом до 64,5% (p=0,04) в гр. привитых сочетано гриппом и пневмококком в сравнении с неиммунизированными работниками - 48,8%.

Результаты показывают, что вакцинация против гриппа выступает в роли индуктора гуморального иммунитета не только к вирусу гриппа, но и к недавно перенесенной инфекцию SARS-CoV-2.

Белки семейства VEGF участвуют в развитии многих клеточных популяций: эндотелиальных клеток, моноцитов и макрофагов, стволовых клеток, опухолевых клеток, мышечных клеток стенок сосудов, клеток трофобласта и в целом любых клеток, экспрессирующих рецепторы к VEGF. Нарушения, затрагивающие продукцию белков VEGF и проведение сигналов от них приводят ко многим патологическим состояниям, в том числе к аномалиям развития плаценты. Клетки трофобласта являются основной популяцией клеток, формирующей плаценту. Они вовлечены в процессы секреции и рецепции VEGF, фактора, необходимого для обеспечения ангиогенеза. Несмотря на это, на данный момент в литературе недостаточно данных о влиянии проведения сигналов от VEGF в клетках трофобласта на их функциональные особенности. Среди клеток окружения трофобласта, которые могут воздействовать на их активность в ходе беременности особой группой являются материнские иммунные клетки, в частности NK-клетки. Принимая во внимание высокую численность NK-клеток в децидуальной оболочке, необходимо учитывать их вклад в изменение фенотипа клеток трофобласта. В настоящем исследовании изучалась экспрессия NK-клетками и клетками трофобласта белков MICA и MICB, а также рецептора CD105. Молекулы MICA и MICB являются маркерами стресса и позволяют судить о жизнеспособности клеток. Рецептор CD105 экспрессирован на поверхности некоторых популяций клеток и участвует в передаче сигнала от белков семейства TGFβ. В частности, показано, что эндоглин регулирует сигналинг от TGFβ путем направления сигнала через пути SMAD2/3 или SMAD1/5/8. Эндоглин, согласно литературе, ингибирует сигналинг, задействующий белок SMAD3. Играет ли эндоглин ту же роль в случае NK-клеток и трофобласта неизвестно. Изучение изменений в экспрессии эндоглина является актуальной проблемой, поскольку сигналы от TGFβ необходимы при дифференцировке популяций трофобласта, а нарушения в механизмах сигналинга могут приводить к невынашиванию. В результате исследования мы показали, что VEGF играет роль в регуляции активности трофобласта и естественных киллеров. В частности, депривация VEGF-A моноклональными антителами против этого цитокина при сокультивировании трофобласта и NK-клеток приводит к угнетению экспрессии CD105 обеими популяциями клеток. При этом суточная инкубация трофобласта с антителами к VEGF не вызывала изменений в их устойчивости к цитотоксической активности естественных киллеров. Вместе полученные результаты говорят о том, что депривация VEGF приводит к значимым изменениям в рецепции белков семейства TGFβ клетками трофобласта и естественными киллерами.

Во многих исследованиях показана ассоциация проявлений гастрита с уровнем содержания конкретных цитокинов. Причем нередко наблюдаются достаточно противоречивые данные. Не изученным в возрастных группах детей является вопрос о связи гастрита и содержания цитокинов крови при наличии семейной предрасположенности к язвенной болезни, которая, как известно, сопряжена с неблагоприятным течением воспалительного процесса в слизистой оболочке желудка.

Цель. Оценить ассоциацию цитокинов в сыворотке крови (IL-2, IL-4, IL-8, IL-18, IL-1β, IFN-α, TNF-α) с гастритом в возрастных группах школьников при семейной предрасположенности к язвенной болезни.

Проведена эзофагогастродуоденоскопия с забором биопсийного материала из слизистой желудка детям с гастроэнтерологическими жалобами в возрасте 7 – 17 лет. Всего обследовано 143 ребенка с морфологическим подтверждением у них гастрита (Сиднейская классификация). Так же определено наличие H. pylori морфологическим методом. Уровень цитокинов сыворотки крови установлен методом ИФА. Различия признаков оценивали с помощью критерия Манна-Уитни.

В ходе исследования установлено, что у школьников с гастритом наличие семейной предрасположенности к язвенной болезни сопряжено с увеличением содержания IFN-α в крови, как в старшей возрастной группе (р=0,001), так и в младшей (р=0,023). При этом между детьми с семейным отягощением в возрастных группах школьников различий содержания IFN-α не было. Кроме того, у старших школьников с отягощением в отличии от младших, отмечено увеличение уровня IL-2 (р=0,001) и IL-4 (р=0,015). У детей с семейной предрасположенностью к язвенной болезни при инфицировании H. pylori, различия содержания цитокинов в зависимости от возраста отсутствовали. Отмечено, что при высокой степени активности (2-3 степень) гастрита различий содержания цитокинов у школьников младшей и старшей возрастных групп не было. Исключение составило содержание IL-4, который был выше у старших школьников при гастрите 1 степени (р=0,049).

Таким образом, у детей в зависимости от наличия семейного отягощения по язвенной болезни имеются отличия цитокинового профиля, с особенностями их содержания в возрастных группах, в частности, это касается уровня IFN-α и IL-4.

В ходе многочисленных наблюдений за пациентами с бронхиальная астмой (БА), вакцинированными от пневмококковой инфекции, было показано существенное снижение частоты обострений и госпитализаций в краткосрочном и среднесрочном периодах после иммунизации. В ряде работ пневмококковые вакцины рассматриваются как потенциальные иммунорегуляторы, улучшающие клиническое течение БА через модуляцию иммунного ответа. Однако из-за гетерогенности самой болезни и применения различных вакцинных препаратов интерпретация результатов исследований несет серьезные ограничения. Цель работы заключалась в проведении сравнительного анализа уровней ключевых цитокинов, характеризующих формирование эндотипа БА у пациентов, после введения конъюгированной пневмококковой вакцины. Материалами исследования являлись сыворотки крови (n=31) пациентов с БА, а также индивидуальные клинические карты испытуемых, иммунизированных 13-валентной конъюгированной пневмококковой вакциной (ПКВ13, Превенар 13). Сыворотки крови посредством метода ИФА исследовали для определения содержания Th1/ Th2/ Treg цитокинов (IFN-γ, IL-4, IL-6, IL-8, IL-10, IL-18, TNF-α и MCP-1), характеризующих наличие различных эндотипов БА, и уровня общего IgE. Временные точки сбора данных в исследовании составляли исходно, через 6 недель, 6 и 12 месяцев после проведенной вакцинации.

Результаты исследования показали, что вакцинация против пневмококковой инфекции с применением ПКВ13 у пациентов с БА сопровождалась высокой клинической эффективностью независимо от эндотипа заболевания, которая соответствует уменьшению числа пациентов с обострениями БА и увеличению количества больных без госпитализаций в течение года наблюдений. Кластеризация пациентов по профилю воспаления позволила выявить специфические паттерны изменений цитокинового профиля, включая статистически значимое повышение концентрации IFN-γ в сыворотке крови спустя 6 недель после проведенной иммунизации у пациентов с эндотипом высокого Т2-воспаления. Статистически значимые изменения наблюдали у пациентов с атопией и повышенным уровнем общего IgE в сыворотке крови, у которых отмечали пик нарастания концентрации IFN-γ также спустя 6 недель после вакцинации. В то же время у пациентов с эндотипом низкого Т2-воспаления не было обнаружено значимых изменений уровней цитокинов в течение года после вакцинации.

Заключение: результаты исследования продемонстрировали значимую роль IFN-g в части возможной корректировки иммунного статуса больных с эндотипом высокого Т2-воспаления после иммунизации пневмококковой конъюгированной вакциной.

Клещевой энцефалит — это природно-очаговое заболевание, распространенное практически на всей территории Российской Федерации. В последние годы растет число очаговых форм данной инфекции. Поэтому, особенно актуальны исследования, которые направленны на выявление ранних предикторов тяжести заболевания и маркеров неблагоприятного прогноза данного заболевания. Целью исследования было определение клинической значимости генов HLA II класса при клещевом энцефалите. Молекулярное типирование HLA-генов DRB1, DQA1 и DQB1 было выполнено у 75 пациентов с клещевым энцефалитом, которые находились на стационарном лечении в Кировской инфекционной больнице и центральных районных больницах Кировской области в 2020-2023 гг., и проводилось методом полимеразной цепной реакции с набором отечественных сиквенс-специфических праймеров (НПФ "ДНК-Технология", Москва). Лихорадочная форма клещевого энцефалита была отмечена у 41,3% пациентов, очаговая – у 34,7%, менингеальная – 16,0%, инаппарантная – у 8%. Для HLA-генов DRB1 группа сравнения включала 1528 практически здоровых индивидов той же популяции населения, для HLA-генов DQA1 и DQB1 – 133 человека. В исследовании были выявлены ряд генов HLA II класса, которые встречаются достоверно чаще у пациентов с КЭ в сравнении с группой контроля (DRB1*1 (c²=12,2; p_c<0,01), DRB1*4 (c²=6,4; p_c<0,05), DRB1*7 (c²=11,7; p_c<0,01), DRB1*8 (c²=4,6; p_c<0,05), DRB1*13 (c²=7,7; p_c<0,01), DRB1*15 (c²=9,3; p_c<0,01), DRB1*16 (c²=14,3; p_c<0,01), DQA1*0102 (c²=7,6; p_c<0,01), DQB1*0401-2 (c²=3,9; p_c<0,05), DQB1*0502-4 (c²=8,1; p_c<0,01). Среди гаплотипов HLA класса II склонность к развитию клещевого энцефалита предопределяли сочетания DRB1*08-DQA1*0401-DQB1*401/402 (c²=5,7; p_c <0,05), DRB1*09-DQA1*0301-DQB1*303 (c²=5,7; p_c<0,05).  и DRB1*16-DQA1*0102-DQB1*502 (c²=7,4; p_c<0,01). Присутствие их в фенотипе человека повышает риск возникновения КЭ в 8 - 9 раз. Для развития лихорадочной формы клещевого энцефалита самым неблагоприятным является носительство гена DRB1*15 (c²=7,8; p_c<0,01; RR=3,1), особенно в гомозиготном состоянии или в сочетании с DRB1*9 (DRB1* 9:15 (χ²=4,1; p_c<0,01; RR=22,6), DRB1* 15:15 (χ²=4,1; p_c<0,01; RR=22,6)). Встречаемость трёхлокусных гаплотипов DRB1*09-DQA1*0301-DQB1*303 (c²=8,8; p_c<0,01) и DRB1*16-DQA1*0102-DQB1*502 (c²=5,0; p_c<0,05)   увеличивает риск развития лихорадочной формы КЭ в 14,5 и 10,9 раз соответственно. У пациентов с менингеальной формой КЭ по сравнению со здоровыми достоверно чаще встречаются гены DRB1*08 (χ²=12,9; p_c<0,01), DQA1*401(χ²=3,9; p_c<0,05), DQB1*401/402 (χ²=9,1; p_c<0,01). Наличие трёхлокусного гаплотипа DRB1*16-DQA1*0102-DQB1*502 (χ²=10,9; p_c<0,01) увеличивает риск развития очаговой формы КЭ в 17,7 раза. Таким образом, клещевой энцефалит ассоциирован с определенными HLA-аллелям II класса, которые можно использовать как прогностический критерий для развития отдельных форм клещевого энцефалита, или клещевого энцефалита в целом.

Хронический вирусный гепатит С (ХВГС) является одной из важнейших проблем здравоохранения. В большинстве случаев инфицирования вирусом гепатита С, инфекция переходит в хроническую форму, для которой характерно развитие фиброза и цирроза печени. При воспалительных процессах в печени вырабатывается большое количество различных цитокинов и хемокинов, которые способны оказывать как протективное, так и повреждающее действие, в частности приводить к гибели гепатоцитов и прогрессированию фиброза печени. Также в патогенезе ХВГС установлено участие ряда ростовых факторов. Целью исследования стала комплексная оценка широкого спектра цитокинов, хемокинов и ростовых факторов в плазме крови больных ХВГС в зависимости от стадии фиброза печени. В исследование было включено 63 пациента с диагнозом «ХВГС», которых в зависимости от стадии фиброза печени разделили три группы. Контрольную группу составили условно здоровые лица (n=32). В плазме крови определяли концентрации следующих цитокинов: интерлейкинов и некоторых цитокинов (IL-1α, IL-1β, IL-1RA, IL-2, IL-4, IL-5, IL-6, IL-7, IL-9, IL-10, IL-12 (p40), IL-12 (p70), IL-13, IL-15, IL-17A, IL-17-E/IL-25, IL-17F, IL-18, IL-27, IFNα, IFNγ, TNFα, TNFβ); хемокинов (CCL2/MCP-1, CCL3/MIP-1α, CCL4/MIP-1β, CCL7/MCP-3, CCL11/Eotaxin, CCL22/MDC, CXCL1/GROα, CXCL8/IL-8, CXCL9/MIG, CXCL10/IP-10, CX3CL1/Fractalkine) и ростовых факторов (EGF, FGF-2, Flt-3L, G-CSF, M-CSF, PDGF-AA, PDGF-AB/BB, TGFα, VEGF-A) методом мультиплексного анализа, основанного на xMAP-технологии. Для статистического анализа применяли методы непараметрической статистики. В результате исследования установлены повышенные концентрации цитокинов IL-12 (p40), IL-15, IL-17E/IL-25, IL-27, IFNγ, TNFα, хемокинов CXCL9/MIG и CXCL-10/IP-10 и ростовых факторов FGF-2 и M-CSF при всех стадиях фиброза печени. При тяжелом фиброзе/циррозе печени обнаружены повышенные концентрации цитокинов IL-1α, IL-1β, IL-2, IL-6, IL-9, IL-10, IL-17F, IFNα, TNFβ, хемокинов CCL2/MCP-1, CCL11/Eotaxin, CCL22/MDC и ростовых факторов G-CSF, TGFα, Flt-3L. Корреляционный анализ выявил связь высокой степени значимости между тяжестью фиброза печени и содержанием цитокинов IL-6, IFNγ, TNFα, IL-7, хемокинов CCL2/MCP-1, CCL11/Eotaxin, CXCL9/MIG, CXCL10/IP-10, CXCL1/GROα, ростовых факторов TGFα, PDGF-AA, PDGF-AВ/ВВ. Таким образом, выявлен определенный профиль цитокинов, характерный для ХВГС, обнаружены цитокины, хемокины и ростовые факторы, значимые для фиброза печени при ХВГС.

Цель настоящей работы - исследовать взаимосвязи содержания в сыворотке крови идиотипических и антиидиотипических антител, специфичных к эстрадиолу (IgA₁-E2 и IgG₂-E2), с генетическими полиморфизмами ферментов репарации ДНК (hOGG1 (rs1052133); XRCC1 (rs25489); ERCC2 (rs13181); APEX1 (rs1130409)) у больных раком молочной железы (РМЖ) с учётом содержания в опухоли Ki-67 экспрессирующих клеток.

Идиотипические и антиидиотипические антитела исследовали с помощью ELISA в сыворотке крови больных РМЖ: 360 с I стадией и 376 со II–IV стадиями. Полиморфизм локусов генов hOGG1:с.977C>G, p.Ser326Cys (rs1052133); XRCC1:c.839G>A, p.Arg280His (rs25489); APEX1:c.444 T>G, p.Asp148Glu (rs1130409); ERCC2:c.2251A>C, p.Lys751Gln (rs13181)  определяли методом аллель-специфической ПЦР с использованием наборов «SNP-экспресс» (НПФ «Литех», г. Москва). У больных РМЖ II–IV стадией с низкими и высокими уровнями IgA₁-E2   высокое содержание в опухоли Ki-67 положительных клеток (>30%) обнаруживали в 47,9% и 58,9% (р = 0,035); с низкими и высокими уровнями IgG₂-E2 в 61,2% и 46,9% (р = 0,001). Высокие уровни Ki-67 в опухоли выявлялись у 55,6% больных II–IV стадиями с одновременно низкими уровнями IgA₁-E2 и IgG₂-E2; у 67,6% – с высокими уровнями IgA₁-E2 и низкими IgG₂-E2; у 43,2% – с низкими уровнями IgA₁-E2 и высокими IgG₂-E2; у 52,2% больных – с одновременно высокими уровнями IgA₁-E2 и IgG₂-E2. Таким образом, IgG₂-E2 тормозили пролиферацию опухоли, а IgA₁-E2 угнетали этот эффект. Не обнаружили взаимосвязи генетических полиморфизмов hOGG1, XRCC1, ERCC2, APEX1 с содержанием в опухоли Ki-67 положительных клеток. Высокие уровни IgA₁-E2 обнаружили у 39,9% больных с CC генотипом hOGG1 и у 47,8% с CG генотипом (р = 0,049). Высокие уровни IgG₂-E2 обнаружили у 65,3% больных с CC генотипом hOGG1 и у 53,7% с CG генотипом (р = 0,003). Высокие уровни IgG₂-E2 в комбинации с низкими IgA₁-E2 встречались у 40,6% больных с CC генотипом hOGG1 и у 27,2% с CG генотипом. Остальные сочетания низких и высоких уровней IgA₁-E2 и IgG₂-E2 встречались чаще у больных с генотипом CG hOGG1. Различия между больными CC и CG генотипами hOGG1 по удельному весу анти-пролиферативного и про-пролиферативных иммунологических фенотипов были статистически значимыми (р = 0,003).

Впервые показано, что образование антител, модулирующих пролиферативную активность опухоли, может быть связано с активностью ферментов репарации ДНК. В частности, образование антител, специфичных к E2, у больных РМЖ ассоциировано с генетическим полиморфизмом hOGG1. Иммуноанализ IgA₁-E2 и IgG₂-E2 можно использовать у больных РМЖ I стадии для оценки пролиферативной активности опухоли при дальнейшем её росте.

Цель исследования - установить влияние полиморфизма гена DEFB1-20G>A и гена DEFB1-52G>A на экспрессию DEFВ1 у пациентов призывного возраста с развитием внебольничных пневмоний. Материалы и методы. Проведено обследование 160 неродственных пациентов призывного возраста (18-20 лет) европеоидной расы. Первая группа (n=80) - пациенты с COVID-19-инфекцией, осложненной нетяжелой пневмонией (n=40) и тяжелой пневмонией (n=40). Вторая группа – клинического сравнения (n=80) – пациенты с острой респираторной инфекцией (ОРИ) негриппозной этиологии, осложненной нетяжелой пневмонией (n=40) и тяжелой пневмонией (n=40). Контрольная группа - 86 практически здоровых мужчин аналогичного возраста. Критерии исключения: наличие родственных связей; пациенты с острой и/или хронической сопутствующей патологией. Методы исследования: клинические; лабораторные (иммунологический – определение DEFВ1 с помощью набора реактивов ELISA Cloud-Clone Corp. (США); генетический (полиморфизм гена DEFB1-20G>A, гена DEFB1-52G>A) - в работе использовались стандартные наборы праймеров НПФ «Литех»-«SNP» (Москва); инструментальные (компьютерная томография). Исследования осуществляли при поступлении в стационар. Статистическая обработка результатов исследования проводилась с помощью пакета программ IBM SPSS Statistics Version 25.0 (IBM, США). Результаты. Установлено преобладание -20А- аллелей и генотипов -20А/А и -52А/А генов DEFB1 у пациентов с развитием тяжелой пневмонии на фоне COVID-19-инфекции. Отмечено увеличение содержания DEFB1 в группе с COVID-19-инфекцией в 1,1 раза по сопоставлению с группой ОРИ и в 1,5 раза – с группой контроля. Изменение уровня DEFВ1 в зависимости от тяжести течения внебольничной пневмонии также характеризуется его повышением в 1,7 раза в группе с тяжелым течением на фоне COVID-19-инфекции и в 1,2 раза у больных с ОРИ. Концентрация DEFB1 значимо повышается при носительстве генотипа -20А/А и генотипа -52А/А гена DEFВ1. Выводы: 1. У пациентов призывного возраста с внебольничными пневмониями регистрируется повышение концентрации DEFВ1 с наибольшими значениями в группе с тяжелыми пневмониями при COVID-19. 2. Носительство генотипа -20А/А и генотипа -52А/А гена DEFВ1 способствует увеличению содержания DEFВ1. 3. Наличие -20А- аллелей и генотипов -20А/А и -52А/А генов DEFB1 ассоциировано с тяжелым течением внебольничных пневмоний у пациентов призывного возраста на фоне COVID-19-инфекции.

Иммуномодулирующие свойства пробиотиков зависят не только от микробных клеток, но и от метаболитов, секретируемых в культуральную среду,  которую исследуют как бесклеточный супернатант и относят к постбиотикам. Цель работы - провести скрининг цитокинового профиля  кишечных штаммов бифидо- и лактобактерий с использованием монононуклеаров периферической крови человека и, сравнив его с цитокиновым профилем типовых  производственных штаммов, отобрать  перспективные штаммы с противовоспалительными свойствами в качестве про-/постбитиков. В работе использовались  типовые производственные культуры бифидо- и лактобактерий, входящие в состав отечественных пробиотиков, и  кишечные штаммы  бифидо- и лактобактерий, отобранные среди выделенных бактериальных культур при исследовании микробиоты толстого кишечника здоровых лиц в возрасте от 18 до 45 лет. Для оценки иммунорегуляторных свойств исследуемых культур определяли  влияние их бесклеточных супернатантов на продукцию про- (IFNγ, TNFα, IL-17, IL-8, IL-6) и противовоспалительных (IL-10, IL-1Ra) цитокинов, секретируемых мононуклеарными клетками периферической крови здоровых людей. Установлено, что по профилю воздействия супернатантов на секрецию цитокинов, как типовые производственные, так и кишечные штаммы, в равной степени распределились по трем типам влияния на цитокиновый профиль мононуклеарных клеток человека: 1 тип: преимущественное  увеличение продукции IL-10 и снижение TNFα, IL-17, IL-6; 2 тип: снижение, в основном,  провоспалительных цитокинов (IL-6, IL-17, IL-8, TNFα, IFNγ) и 3 тип: снижение секреции как про-, так и  противовоспалительных цитокинов. Среди кишечных культур 1и 2 типа высоким противовоспалительным потенциалом обладали штаммы Bifidobacterium bifidum ICIS-202 и Bifidobacterium bifidum ICIS-504, способные не только подавлять секрецию провоспалительных цитокинов, но и усиливать продукцию противовоспалительных цитокинов. Кроме того, перспективной культурой оказался штамм лактобактерий L. ruminis ICIS-540, супернатант которого характеризовался многократной способностью снижать уровень раннего провоспалительного цитокина TNFα. В целом, было установлено, что  выраженность противовоспалительной активности указанных штаммов не уступает, а в отношении отдельных цитокинов (IL-10, TNFα, IL-6) превосходит известные пробиотические штаммы. Использование бесклеточных супернатантов, содержащих продукты метаболизма микроорганизмов, для оценки их влияния на уровень цитокинов in vitro позволило отобрать перспективные штаммы L. ruminis ICIS-540, B. bifidum ICIS-504 и  B. bifidum ICIS-202, пригодные для создания бактерийных препаратов с противовоспалительной активностью. Результаты исследований могут быть использованы в практике при отборе и тестировании кишечных штаммов по влиянию их на цитокиновый профиль клеток хозяина для создания новых биопрепаратов таргетного действия.

Актуальность: YB-1 - мультифункциональный белок, фактор транскрипции, участвующий в регуляции многочисленных клеточных процессов. YB-1 является важным участником молекулярных каскадов, через которые регулируются реакции организма на присутствие возбудителя, активность воспаления, эффективность заживления и излечения. Эти функции YB-1 являются актуальными и при таком социально-значимом заболевании, как туберкулёз лёгких, при котором выявление транскрипционной активности YBX1 и роли YB1 в патогенезе ранее не проводилось. В связи с этим, была поставлена цель исследования: определить у больных туберкулёзом лёгких (туберкулёмами) наиболее значимые корреляции между экспрессией гена белка YB-1, генами ключевых цитокинов, участвующих в регуляции воспаления при ТБ (IL-6, IL-10, INF-γ, TGF-β, TNF-α, IL-1β), фактором гипоксии HIF1a и геном белка P-gp ABCB1. Методы: уровни экспрессии генов определяли с помощью количественной ПЦР в образцах перифокальной области гранулем, полученных от 35 пациентов в ходе плановой операции. На основе результатов ПЦР был проведен корреляционный и иерархический кластерный анализ. Статистическую обработку проводили с помощью статистического пакета GraphPad Prism Version 7.04. Корреляцию между переменными оценивали с помощью коэффициента корреляции Спирмена. Иерархический кластерный анализ и тепловые карты выполняли с использованием инструмента ClustVis 2.0. Результаты: обнаружена положительная корреляция между экспрессией генов YBX1, TGFB1 и ABCB1. Корреляция между экспрессией генов YBX1 и ABCB1 умеренная, при этом экспрессия гена ABCB1 имеет сильную положительную корреляцию с генами HIF1A и IL6. Наиболее сильная корреляция выявлена между YBX1 и TGFB1 (r=0,62). Корреляция YBX1 с генами других цитокинов отсутствует. При этом TGFB1 имеет умеренную корреляцию с TNF (r=0,56).  Взаимосвязь YBX1 с TGFB1 также подтвердил иерархический кластерный анализ, который демонстрирует формирование единого кластера генов YBX1, TGFB1, TNF. Обсуждение и заключение: мы предполагаем, что выявленный в нашей работе кластер генов YBX1, TGFB1, TNF образует регуляторную систему, играющую важную роль в развитии туберкулезного воспаления. Наша работа расширяет данные о молекулярно-генетической характеристике одной из форм туберкулёзом лёгких – туберкулёмах. Мы предполагаем, что белок YB-1 потенциально может выполнять при туберкулёзом лёгких разные функции: выступать в качестве одного из участников туберкулёзного воспаления через влияние на экспрессию генов ключевых цитокинов, а также модулировать активность белка-транспортёра P-gp и изменять фармакокинетику противотуберкулёзных препаратов, что требует дальнейшего изучения.

Введение: известно, что фибрилляция предсердий может приводить к протромботическому или гиперкоагуляционному состоянию с аномальным гемостазом, с развитием тромбоэмболических осложнений, фибринолизом и эндотелиальной дисфункцией. Исследования последних лет демонстрируют повышенный интерес к разработке новых лабораторных методов оценки риска возникновения ТЭО. Одним из биомаркеров, проявляющим важные противовоспалительные, антикоагулянтные и антифибринолитические свойства и участвующим в поддержании сосудистого гомеостаза является растворимый тромбомодулин (sTM).  

Цель: исследование содержания растворимого тромбомодулина в сыворотке крови у больных с фибрилляцией предсердий неклапанного генеза, получающих антикоагулянтную терапию и имеющих в анамнезе тромботические осложнения и пациентов с фибрилляцией предсердий без тромботических осложнений.

Материалы и методы: в исследование были включены  60 пациентов, старше 18 лет с диагнозом фибрилляция предсердий, верифицированном на основании клинических рекомендаций, получающих антикоагулянтную терапию. Из них у 21 пациента произошло развитие тромботических осложнений на фоне адекватной антикоагулянтной терапии, а также в исследование было включено 22 здоровых добровольца. Все пациенты дали свое письменное информированное согласие на включение в исследование. Исследование растворимого тромбомодулина (нг/мл) проводилось методом иммуноферментного анализа с использованием оборудования Центра коллективного пользования «Медицинская геномика» Томского НИМЦ.

Результаты: все обследованные пациенты были разделены на 2 группы: группа пациентов с фибрилляцией предсердий без тромботических осложнения и группа пациентов с фибрилляцией предсердий с возникшими тромботическими осложнениями. Содержание растворимого тромбомодулина в сыворотке крови у пациентов с возникшими тромботическими осложнениями было снижено по сравнению как с группой пациентов без ТО, так и с группой практически здоровых добровольцев. Анализ уровня sTM у мужчин и женщин в группах пациентов и у здоровых добровольцев показало, что наиболее низкие значения данного биомаркера в сыворотке крови отмечены у женщин из группы пациентов с фибрилляцией предсердий с ТО  Ме- 1,91 (1,80;2,53) по сравнению с женщинами из группы пациентов без тромботических осложнений Ме-2,65 (1,99;2,92) и со здоровыми женщинами Ме-2,60 (1,83;3,07), р ≤ 0,05. Также, отмечается сниженное содержание растворимого тромбомодулина у мужчин с тромбозами по сравнению со здоровыми мужчинами Ме-2,15 (1,94;2,50) и 3,03 (2,55;3,31) соответственно. Сравнительный анализ уровней растворимого тромбомодулина у женщин и мужчин во всех группах больных с фибрилляцией предсердий и у здоровых добровольцев не выявил статистически значимых различий.

Заключение: в изученной группе больных с фибрилляцией предсердий неклапанного генеза, получающих антикоагулянтную терапию, было отмечено снижение растворимого тромбомодулина в подгруппе пациентов с возникшими тромботическими осложнениями.

Введение. За счет разработки эффективных методов активации и генерации натуральных киллеров in vitro современныe способы адоптивной иммунотерапии онкологических больных получили новое развитие. Цель. Целью данного исследования явилось изучение экспрессии маркеров активации на натуральных киллерах после генерации и активации in vitro с помощью проточной цитометрии. Материалы и методы. Мононуклеарные клетки выделяли из периферической крови 10 доноров на градиенте плотности и культивировали в среде RPMI-1640 («Sigma-Aldrich») с добавлением IL-2 с клеток TMDК562-15 в течение 14 дней. Цитофлуориметрический анализ проводили на 0, 7 и 14 дни культивирования на цитометре Image Stream MkII («Luminex», США). Применяли 10-цветную панель моноклональных меченых антител к СD45/3/56/16 и маркерам активации CD38/HLA-DR/CD25 («BD Biosciences»). Цитотоксическую активность натуральных киллеров, полученных от доноров, оценивали на 14-й день культивирования в отношении опухолевых мишеней AsPC-1, А-549, MDA-MB-231 и PC-3, при соотношении «эффектор:мишень» 5:1 и 10:1 в течение 12 часов. Статистический анализ осуществляли с помощью «MS Excel 2016», TIBCO STATISTICA 11. Результаты. До начала культивирования доля натуральных киллеров в составе мононуклеарных клеток составляла в среднем 13%, из которых CD38/HLA-DR/CD25 экспрессировали 7,6/0,7/0%. Длительное культивирование мононуклеарных клеток in vitro привело к активации и изменению доли субпопуляций лимфоцитов. Количество натуральных киллеров на 14 день культивирования увеличилось в 390 раз, и доля натуральных киллеров составила 86,5%. Среди них на 14 день культивации активационные рецепторы CD38/HLA-DR/CD25 экспрессировали соответственно 34,7/36,5/5% натуральных киллеров. При изучении цитотоксичности полученных натуральных киллеров по отношению к клеткам различных опухолевых линий через 12 часов после внесения натуральных киллеров наблюдали 100% лизис клеток-мишеней. Жизнеспособность клеток у всех доноров была более 98%, на 7 день несколько снижалась и в среднем составляла 81%, к окончанию культивирования показатель достигал уровня более 95%. Выводы. Предложенный способ культивирования мононуклеарных клеток позволяет значительно увеличить пролиферативную активность и экспрессию активационных маркеров натуральных киллеров при сохранении высокой жизнеспособности популяции, полученной в процессе культивирование. Функциональная активность натуральных киллеров подтверждается в цитотоксическом тесте по отношению к клеткам опухолевых линий.

Хронические диффузные болезни печени являются одной из актуальных проблем в современном мире. Цель исследования – оценить уровень цитокинов - IL-6, IL-18, IL-1α, IFN-γ, TNF-α, TGF-β1 на модели табачной интоксикации и при введении «Гептора» в течение 7, 14, 21 дня.

Материал и методы. Исследования проводились на крысах-самцах, разделенных на интактных и 3 опытные группы по 10 крыс в каждой. В течение одного, двух и четырех месяцев животные находились в табачном дыме. После четырехмесячного воздействия (третья группа) вводили per os «Гептор» в дозе 120 мг/кг с дистиллированной водой 7, 14, 21 день. 

Результаты. В 1-ой группе уровень TNF-α повысился цитоплазматической фракции ткани печени в 1,6 раза пос сравнению с интактной группой, во 2-ой группе – повысился в 1,7 раза, в 3-ей группе – увеличился в 1,9 раза. Концентрация IL-6 отмечалась высокой после четырех месячной табачной интоксикации. TGF-β1 зачимо увеличился в этот же срок, гистологически вывлялись деструктруктивные изменения и фиброз в печени. Использование препарата «Гептор» у животных третьей группы способствовало снижению уровня провоспалительных цитокинов IL-18, IL-6, IFN-γ в ткани печени и TNF-α, TGF-β. Вследствие их воздействия отмечалось уменьшение воспалительной реакции, детруктивных изменений и степени фиброза, развивалось постепенное восстановление структурной организации печени.

В последнее время проточная цитофлуориметрия используется как в научных целях, так и в рутинной лабораторной практике. Круг задач, решаемых методом проточной цитофлуметрии постоянно расширяется и на данный момент проточная цитофлуметрия используется не только для диагностики гемобластозов и оценки эффективности терапии, но и является перспективным методом анализа функционирования различных популяций клеток, в том числе нейтрофилов крови, играющих роль в патогенезе целого ряда иммунодифицитных состояний, сопровождающихся развитием рецидивирующих бактериальных инфекций. Данная работа посвящена внедрению в лабораторную практику метода определения фагоцитарной активности нейтрофильных гранулоцитов с помощью проточной цитофлуориметрии. При проведении исследования данный тест был сопоставлен с традиционно используемым в лаборатории методом простой визуальной оценки реакции фагоцитоза суспензии пекарских дрожжей. Результаты фагоцитарной активности нейтрофилов, полученные методом проточной флуориметрии оказалась более воспроизводимыми, легко контролировались по сравнению с методом простой визуальной оценки. В ходе работы было установлено, что на результаты исследования параметров фагоцитоза, измеренных методом проточной цитофлуориметрии, не оказывает влияние пол и возраст пациентов. Поэтому были рассчитаны единые границы референтных интервалов для различных категорий пациентов. Клиническая апробация метода определения фагоцитарной активности нейтрофильных гранулоцитов с помощью проточной цитофлуориметрии была проведена на группе пациентов, страдающих рецидивирующими бактериальными инфекциями. Оценка фагоцитарной активности методом проточной цитофлуориметрии позволила выявить пациента с дефектом фагоцитарного звена, в то время как метод простой визуальной оценки реакции фагоцитоза суспензии пекарских дрожжей оказался в данной ситуации недостаточно чувствительным, и полученные показатели фагоцитарной активности нейтрофилов не выходили за границы референтных интервалов. Таким образом, метод определения фагоцитарной активности нейтрофильных гранулоцитов с помощью проточной цитофлуориметрии предпочтителен при использовании его в рутинной лабораторной практике по сравнению с методом простой визуальной оценки реакции фагоцитоза суспензии пекарских дрожжей.

Decidual NK cells, found in area of uteroplacental contact, exhibit distinct phenotypic and functional characteristics compared to NK cells present in peripheral blood. However, mechanisms underlying development of these unique properties remain poorly understood. It is postulated that microenvironmental cells exert both direct and indirect influence on NK cells within the uterus, modulating their level of "aggressiveness" towards fetal tissues, including trophoblasts.

One of mechanisms of remote regulation of NK cells is release of cytokines. Trophoblasts, as well as other elements of the microenvironment, such as uterine macrophages or endometrial cells, produce biologically active molecules called cytokines. These cytokines bind to receptors on the surface of target cells, triggering a series of signaling cascades that lead to changes in the behavior of NK cells. As a result, NK cells themselves can release cytokines, which in turn influence the behavior of other cells in the vicinity. As mentioned previously, there is a lack of data on causes and mechanisms behind changes in characteristics of NK cells in uterus. Nevertheless, this data can form the foundation for creating a more accurate cellular model of interaction between fetal cells and the mother's immune system. Additionally, it can serve as a basis for developing diagnostic tools for reproductive issues.

The aim of the study was to investigate changes in the cytokine profile of NK cells, specifically their production of TNFα, TGFβ, IFNγ, RANTES, IL-10, and VEGF under the influence of cytokines associated with pregnancy – TNFα, IFNγ, TGFβ1, IL-15, IL-18, or IL-10.

The levels of these cytokines in the conditioned media of NK cells were measured using flow cytometry. It was found that transforming growth factor β1 (TGF-β1), produced by trophoblasts, has the ability to regulate NK cell secretion. Under its influence, the levels of IFNγ, IL-10, and RANTES in the media derived from NK cell culture decreased.

Based on these findings, it can be inferred that there exists a system involving decidual NK cells and trophoblast cells that controls excessive or insufficient activity of NK cells via the cytokine network. These data suggest the potential for using TGFβ1 to model interaction between NK cells and trophoblasts in vitro.

Исследования последних лет указывают также на роль генетических факторов, а именно полиморфизма генов молекул основных иммунных звеньев противовирусного ответа на риск заражения COVID-19, тяжелого течения и вероятности летального исхода, а также развития клинических или лабораторных изменений в постковидном периоде. Интерлейкин-2 (IL-2) играет важную роль в иммунопатологии COVID-19, однако данных о влиянии однонуклеотидного полиморфизма (ОНП) генов, кодирующих молекулу IL-2 330T/G (rs2069762), на молекулярные изменения в постковидном периоде на данный момент практически нет. Целью исследование было изучение различий в показателях маркеров системного воспаления, кишечной проницаемости и сосудистой регуляции у пациентов с постковидным синдромом и различными вариантами ОНП гена IL-2 330T/G. В исследование было включено 54 пациента (28 женщин (51,85%) и 26 (48,15%) мужчина, средний возраст 45,6±6,14 лет), перенесших COVID-19. Всем пациентам проводился анализ полиморфизма IL-2 T-330G методом аллель-специфической полимеразной цепной реакции с электрофоретической детекцией. Аллель-специфическую ПЦР проводили с использованием набора "IL-2 T-330G" (Литех, Россия) в соответствии с инструкциями производителя. Детекция продуктов амплификации проводилась методом горизонтального электрофореза в 3% агарозном геле. Содержание C-реактивного белка (CRP) (мг/л), липополисахарид-связывающего белка (LBP) (нг/мл), тканевого активатора плазминогена (tPA) (нг/мл), зонулина (нг/мл), эндотелина-1 (пг/мл) и ангиотензина-2 (пг/мл) в плазме крови определялось количественным высокочувствительным иммуноферментным методом с использованием теста ELISA производства Cloud Clone corp. (Ухань, Хубей, Китай). У пациентов с гомозиготным вариантом GG полиморфизма гена T-330G IL-2 наблюдаются достоверно более низкие показатели уровня CRP, чем в группе гетерозигот TG (p=0,013) и гомозигот TT (p=0,039). Уровень tPA был статистически значимо выше в группе гомозигот GG, по сравнению с гомозиготами TT (p=0,017). Наиболее высокие значения зонулина были зарегистрированы у гетерозиготной группы TG, по сравнению с гомозиготами TT (p=0,013). Наивысшие показатели ангиотензина-2 были выявлены в группе с гомозиготным вариантом TT ОНП IL-2 T-330G (p<0,05). Статистически значимых колебаний LBP и эндотелина-1 между исследуемыми группами зарегистрировано не было. Полиморфизм T-330G гена IL-2 ассоциирован с рядом молекулярных изменений в постковидном периоде, которые потенциально могут влиять как на клинические проявления постковидного синдрома, так и на его отдаленные последствия в последующей перспективе. Необходимо дальнейшее более углубленное изучение взаимосвязи ОНП T-330G гена IL-2 для понимания клинических аспектов постковидного синдрома.

Наличие FcᵧRIIIb (CD16) на поверхности нейтрофильных гранулоцитов (НГ) крови человека наделяет эти клетки через взаимодействие с IgG ключевым свойством адаптивного иммунитета: антигенспецифическим клеточным ответом. Целью работы явилось сравнение ex vivo реакции  FcᵧRIIIb НГ человека в ответ на добавление в кровь живых клеток условно-патогенных (Escherichia coli,  Staphylococcus aureus) и патогенных (Yersinia pestis, Brucella abortus) видов бактерий. Материалы и методы. Плотность экспрессии  СD16 на НГ определяли методом проточной цитометрии в условных единицах интенсивности флуоресценции (MFI) после окраски лейкоцитов реагентами CD45-FITC и CD16-PE (Backman Coulter, USA) при иммунофенотипировании их в крови согласно Lyse/No-Wash протоколу. Для моделирования бактериемии использовали аттенуированные (вакцинные) штаммы B. abortus 19BA и Y.pestis EV НИИЭГ, а также штаммы S. aureus ATCC 6538 (209-P) и E.coli ATCC 25922. Кровь получали от здоровых доноров (n=10), не прививавшихся от чумы и бруцеллеза. Бактерии 4-х видов добавляли в образцы крови каждого донора в дозе 10⁸ м.к./мл и результаты учитывали по исследуемому показателю через 30 мин,1,2 и 6 ч инкубации. Результаты. Условно-патогенные бактерии, в отличие от Y. pestis и B. abortus, вызывали, начиная с 2 ч инкубации, резкое снижение плотности экспрессии FcᵧRIIIb на НГ крови человека, что являлось маркером развития ex vivo IgG-обусловленной анафилаксии, связанной с присутствием в крови всех здоровых взрослых  людей IgG к специфическим антигенам E. coli и S.aureus. Изменения по маркеру CD16, индуцируемые в НГ условно-патогенными бактериями, предшествовали дегрануляции и лизисy этих клеток в условиях ex vivo, в то время как в присутствии  Y. pestis и B. abortus нейтрофилы в течение 6 ч не подвергались дегрануляции и цитолизу.  Заключение. Полученные в работе экспериментальные данные  отражают известный факт участия в обезвреживании E. coli и S.aureus феномена  внеклеточной антителозависимой цитотоксичности НГ, который реализуется в потоке крови с помощью механизма нетоза и играет решающую роль в предотвращении сепсиса. Отсутствие реакции молекулярного триггера нетоза CD16  на   Y. pestis и B. abortus свидетельствует о том, что в организме человека, не привитого против чумы или бруцеллёза, этот защитный антителозависимый механизм бактерицидности не работает. Оценка реактивности FcᵧRIIIb c использованием проточной цитометрии  на модели бактериемии ex vivo перспективна для  разработки информативного теста оценки специфического иммунитета.